背景结直肠癌是世界第三高发恶性肿瘤,其中肿瘤转移是导致患者死亡的主要原因。肿瘤发生是一个多步骤、多阶段、多基因的复杂过程。近年研究发现PXMP4参与前列腺癌的发生,但是PXMP4在结直肠癌中的功能未知。课题组通过生物信息学发现PXMP4是结直肠癌组织和正常结直肠粘膜组织中的差异表达基因。拟利用基因转染、体外增殖、体外侵袭、迁移实验研究:检测PXMP4在结直肠癌增殖、侵袭和迁移中的作用,为结直肠癌的诊治提供新靶点。目的以LOVO、RKO、SW620、SW480、HCT116和DLD1六株结直肠癌为研究对象,分析PXMP4的表达情况,并通过细胞功能实验研究PXMP4对结直肠癌细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响。方法1.通过(gene expression omnibus,GEO)数据库等生物信息学方法分析PXMP4在配对的结直肠癌和正常组织中的表达情况。2.利用免疫组织化学(immunohistochemistry,IHC)检测结直肠癌石蜡样本中PXMP4的表达,并分析PXMP4的表达与肿瘤大小、分化、淋巴结转移等相关临床病理参数的关系。3.利用qRT-PCR和western blot方法检测PXMP4 mRNA和蛋白在六株结直肠癌细胞中的表达。4.构建过表达和干扰PXMP4的结直肠癌细胞株并用qRT-PCR和western blot实验验证PXMP4表达。5.利用Transwell、CCK-8和划痕实验检测PXMP4对结直肠癌细胞株增殖、侵袭、迁移能力的影响。结果1.GEO基因表达数据库显示PXMP4是结直肠癌组织和正常组织中的一个差异表达基因。2.IHC结果表明:PXMP4主要定位于细胞器膜,呈棕黄色;在112例结直肠癌患者组织蜡块中,80例结直肠癌组织中PXMP4的表达高于其配对的正常黏膜组织;PXMP4的表达与患者的年龄、性别及肿瘤大小没有差异(P>0.05),而与分化程度和淋巴结转移密切相关,差异具有统计学意义(P<0.05)。3.qRT-PCR和western blot结果表明,6株结直肠癌细胞中PXMP4的表达差异显著(P<0.05),其中HCT116和SW620高表达,RKO和SW480低表达。4.CCK-8实验结果表明,过表达组细胞的生长速度明显快于空载组(P<0.05);干扰组细胞的生长速度显著慢于对照组(P<0.05)。5.Transwell侵袭实验结果表明,过表达组穿过小室的细胞数量显著多于对照组(P<0.05);而干扰组穿过小室的细胞数量显著少于对照组(P<0.05)。6.划痕实验结果表明,过表达组的迁移速度明显快于与对照组,而干扰组的迁移速度显著慢于对照组。Transwell迁移实验结果表明,过表达组穿过小室的细胞数量显著多于对照组(P<0.05);而干扰组穿过小室的细胞数量显著少于对照组(P<0.05)。结论1.PXMP4表达在结直肠癌组织中显著上调,其与肿瘤分化程度以及淋巴结转移有关,而与年龄、性别、以及肿瘤大小无关。2.PXMP4促进结直肠癌细胞的增殖、侵袭和迁移能力。