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黄草乌为毛茛科乌头属Aconitumvilmor inianum Kom.的干燥块根,在云南民间广泛使用,具有祛风除湿、温经止痛、解毒消肿等功效,用于风寒湿痹、手足厥冷、跌打损伤、疮毒等。已收入1996年版的《云南省药品标准》,在记载中仅有药材性状描述及显微特征的描写,以及常规的生物碱定性鉴别,用于判定黄草乌的真伪、质量优劣、安全性,显得依据不足,这制约了黄草乌的进一步开发。
本课题选取云南地方习用药材黄草乌,采用性状鉴别、显微鉴别、理化鉴别等方法对黄草乌地下部分(块根)和地上部分分别进行生药学研究;采用HPLC法,以滇乌碱化学成分作为定性、定量检测的指标性成分,对不同产地的黄草乌块根与地上部分的滇乌碱化学成分进行研究,并对水解不同时间后的滇乌碱含量进行测定;同时,对黄草乌地下部分(块根)和地上部分的抗炎、镇痛作用进行初步研究,为黄草乌的进一步开发利用、扩大新药源、保证临床用药安全以及黄草乌块根质量标准的补充研究提供了详细资料,也为黄草乌同科属植物的相应研究提供借鉴。
本课题主要的研究内容有:
一、黄草乌地下部分(块根)和地上部分的生药学研究,采用性状鉴别、显微鉴别、理化鉴别等方法。
一、黄草乌地下部分(块根)的浸出物、水分、灰分、重金属的测定:参照《中华人民共和国药典》2005版附录方法,测得:水溶性物质冷浸法平均含量为4.67%、热浸法平均含量为11.61%,醇溶性物质冷浸法平均含量为1.37%、热浸法平均含量为3.59%,挥发性醚浸出物平均含量为0.72%,含水量为8.43%,总灰分为1.47%,酸不溶性灰分为0.148%,炽灼残渣的含量为5.005%,重金属检查合格。
三、黄草乌地下部分(块根)和地上部分滇乌碱化学成分的含量测定方法研究:采用高效液相色谱法测定,色谱条件:Waters: XTerra msc185.0μm4.6mm×250mm分析柱,流速:1ml/min,柱温:30℃,检测波长260nm,流动相:三乙胺:甲醇(36:64),云南昆明黄草乌块根中滇乌碱的含量为0.1392%,云南个旧的为0.0986%,云南晋宁的为0.0913%,云南昆明黄草乌地上部分中的滇乌碱含量为0.0495%,云南个旧为0.03470/0,云南晋宁为0.0294%,该方法简便、快速、结果准确、重现性好,可以作为黄草乌药材及相关制剂质量控制的一个有效方法。
四、黄草乌地下部分(块根)和地上部分水解不同时间后的滇乌碱含量测定:选取昆明黄草乌的块根及晋宁黄草乌的地上部分分别水解0.5h,2h,4h,6h后,采用高效液相色谱法对滇乌碱含量进行测定,黄草乌的块根水解0.5h后的滇乌碱平均含量为0.0653%,水解2h后为0.0504%,水解4h为0.0411%,水解6h后为0.0245%,地上部分水解后滇乌碱含量难于测出,通过实验结果可看出随着水解时间的延长滇乌碱的含量也随着降低,其中地上部分下降的较多,黄草乌的块根在水解6h后滇乌碱含量下降得较多。
五、黄草乌地下部分(块根)水煎浸膏和地上部分水煎剂的急性毒性实验及抗炎、镇痛实验研究:黄草乌地下部分(块根)采用最大剂量给药,最大给药剂量=10.36g生药/kg.bw(相当于临床用量的207倍),地上部分通过对半数致死量的测定计算给药量,通过对水解不同时间的黄草乌块根和地上部分进行抗炎、镇痛实验的研究,结果表明在水解不同时间0.5h,2h,4h后,块根和地上部分均能够显示出明显的抗炎、镇痛作用。