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目的:探讨不同浓度苦参碱对神经母细胞瘤(NB)细胞SH-SY5Y存活及凋亡的影响;及是否可以降低顺铂化疗的耐药性以及可能的机制。
方法:分别以全反式维甲酸(ATRA)、脑源性神经生长因子(BDNF)、顺铂(CDDP)、苦参碱(Matrine)处理SH-SY5Y细胞,实验分为如下几组:对照组、ATRA诱导的顺铂干预组、顺铂干预组、不同浓度苦参碱(0.5mg/ml、1.5mg/ml、2.5mg/ml)干预组、不同浓度苦参碱(0.5mg/ml、1.5mg/ml、2.5mg/ml)联合顺铂干预组。应用四甲基偶氮蓝比色法(MTT)检测苦参碱与顺铂对NB细胞株SH-SY5Y存活率的影响,流式细胞术(FCM)检测苦参碱与顺铂对NB细胞株SH-SY5Y凋亡率的影响,Western-blot方法检测NB细胞株SH-SY5Y的p-TrKB的表达。
结果:MTT法检测SH-SY5Y各组细胞的存活率(%)分别为:90.75±6.94;88.61±10.22;55.31±1.83;77.37±2.24;61.21±7.92;44.71±9.51;63.58±15.71;42.12±10.00;28.84±19.67。FCM法检测SH-SY5Y细胞的凋亡率(%)分别为:6.89±1.03;7.63±1.38;16.36±2.57;8.42±1.76;14.79±2.37;18.46±2.44;18.55±1.40;31.76±1.55;40.74±3.27。除经ATRA诱导的顺铂干预组外,各组存活率均低于对照组、凋亡率较对照组高,差异有统计学意义(P<0.05);未经ATRA诱导顺铂干预组存活率低于经ATRA诱导的顺铂干预组、凋亡率高于后组,差异有统计学意义(P<0。05);相同浓度的苦参碱干预组与苦参碱联合顺铂干预组比较,前组存活率较后组高,后组凋亡率高于前组,差异有统计学意义(P<0.05)。未经ATRA诱导顺铂干预组的存活率高于苦参碱联合顺铂组、凋亡率低于苦参碱联合顺铂组,差异有统计学意义(P<0.05)。苦参碱0.5mg/ml组与经ATRA诱导的顺铂干预组存活率、凋亡率类似,差异无统计学意义(P>0.05)。Western-blot分析显示各组间p-TrKB的表达水平比较无统计学意义(P>0.05)。
结论:苦参碱可以抑制SH-SY5Y细胞系增殖、诱导凋亡,可以提高顺铂化疗的敏感性,在本实验范围内浓度越高这种抑制增殖、诱导凋亡作用越明显。与TrKB/BDNF信号通路(间)无相关性。