真菌是自然界中重要的生物资源,具有多种生物活性,被应用在农作物病虫害防治、纤维素与木质素降解、生物菌肥、医用抗生素、化妆品与保健品等领域。大兴安岭森林物种多样性独特而丰富,林下凋落物中,仍然存在大量未被开发利用的真菌资源。本研究以大兴安岭森林凋落物为分离材料,利用颗粒稀释法分离可培养真菌,利用真菌ITS序列进行鉴定,分离鉴定了30株凋落物真菌,它们隶属于3个门,6个纲,11个目,23个科,27个属,28个分类单元,其中有8株真菌与已知真菌ITS序列相似性≤98.5%,这些真菌为尚未描述的真菌菌株,本研究首次报道了它们的抗植物病原菌活性、清除自由基活性、纤维素降解活性。对30株凋落物真菌进行了生物活性筛选:利用5株植物病原细菌与真菌,测试30株凋落物真菌6种发酵粗提物的抗菌活性,发现了23株真菌具有抗菌活性,其中菌株SGSF836（Paraconiothyrium cyclothyrioides）抗菌活性较强且抗菌谱较广。通过DPPH自由基清除法,测试30株凋落物真菌6种发酵粗提物的抗氧化活性,首次发现菌株SGSF445（Pyrenochaeta sp.,ITS相似为95%）、SGSF953（Umbelopsis vinacea）、SGSF961（Peyronellaea prosopidis）与SGSF980（Xylomelasma sordida）具有较强的清除自由基活性,其中SGSF953含有两个活性化合物（Rf值:0.78,0.89）。通过利用刚果红染色法,首次发现菌株SGSF982（Rhinocladiella atrovirens,ITS相似性93%）具有较强的纤维素降解活性,该菌株的水解圈与菌落直径比值最大（1.92±0.75）。通过溶磷活性筛选,发现6株真菌具有溶磷活性,首次发现菌株SGSF806（Leptosphaeria biglobosa）与SGSF830（Phacidium dicosmoanum）溶磷效果有较强。本研究发现了多株具有良好生物活性的凋落物真菌,其中包括多株未描述真菌的新活性及已知物种的新活性,为进一步研究真菌的生物活性以及为大兴安岭森林真菌资源开发利用提供了备选菌株与理论基础。