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根据最新的数据统计显示,恶性肿瘤目前已成为全球范围内致死率排名第二的疾病,每年新增的病例数量都呈现上升趋势。寻求安全、有效、无或低毒副作用的预防、治疗手段和抗癌药物成为该领域生命科学与医药科学工作者的重要追求。在抗肿瘤新药的研发领域中,无需手术、副作用小等优点让天然植物药物成为新的热点。天然植物抗菌液(PAMs)是由云南民族医药研究所有限公司研发的一种新型民族医药复方制剂,经用乙醇提取红花、芸香草、刺天茄、紫草等多种天然药用植物的有效成分精制而成。民间体验和前期研究证实, PAMs具有抗菌消炎、伤口愈合、溃疡修复等多种功效,体外研究还发现,PAMs对白血病、肝癌、乳腺癌、宫颈癌等多种恶性肿瘤细胞株均有强的杀伤作用,揭示PAMs作为一种传统民族医药在抗癌领域的潜力和前景。作为一种含有多种植物成分的复方制剂,PAMs的抗癌作用及分子机理尚需探究。本论文中,我们以人源肝癌HepG2细胞为主要研究对象,探究PAMs在体内外对其的抑制作用及分子作用机理。同时初步探究了PAMs对乳腺癌细胞MCF-7、MDA-MB-231的体外杀伤作用。首先,以HepG2、MCF-7、MDA-MB-231三株恶性肿瘤细胞为对象,初步研究了PAMs对他们的杀伤作用。形态学观察与CCK8法确定了PAMs对三种细胞的增殖均具有杀伤作用,且杀伤效果与药物浓度、作用时间呈依赖性。细胞划痕实验、Transwell实验结果相互印证了PAMs可以有效抑制这三种细胞的体外迁移。随后,以HepG2细胞为研究对象,Western Blot法检测到与细胞凋亡有关的FoxM1蛋白表达量的下调,抑癌基因p53蛋白表达量的上调,与预期结果一致。然后,选用了BALB/c (nu/nu)裸鼠建立体内HepG2移植瘤模型,共设定阴性对照组(Alcohol control组)、药物组(PAMs组)、提前给药组(Pre-PAMs组)、阳性对照组(5-Fu组)四组。裸鼠左腋皮下注射HepG2细胞后100%成瘤。接种细胞后三周处死裸鼠,剥离出裸鼠肿瘤组织,解剖观察其脏器生长情况,称量瘤重、肝重量、脾脏重量,计算抑瘤率、肝指数、脾脏指数。HE染色观察肿瘤病理变化,Tunel法观察肿瘤细胞凋亡情况,免疫组化测定不同实验组移植瘤组织细胞中caspase3、caspase9蛋白表达量的变化,ELISA测定裸鼠经过药物治疗后血清中IL-12、TNF-α、VEGF的变化。FQ-PCR、Western Blot从mPNA水平和蛋白水平探究PAMs对肝癌的抑制作用途径。结果显示,与阴性对照组相比,PAMs组、Pre-PAMs组、5-Fu组的抑瘤率分别为55.13%、57.43%、56.58%,呈现出极显著的统计学差异(**P<0.01)。5-FU组裸鼠的肝指数、脾脏指数均出现异常,与对照组呈现明显的差异(*P<0.05),而PAMs组和Pre-PAMs组则与对照组无统计学差异,揭示PAMs对裸鼠体液免疫系统无伤害,与阳性药物相比,毒副作用较小。PAMs组与Pre-PAMs组中的caspase3、caspase9蛋白表达量均有明显上调,MMP-2、FoxM1、p53的mRNA表达量与蛋白表达量均出现下调。而两组VEGF的含量出现了一定程度的下降,与空白组相比具有极显著性差异(**P<0.01),IL-12、TNF-α出现了一定程度的上升,与空白组相比差异显著(*P<0.05),以上结果也与抗菌液对肝癌肿瘤生长的抑制作用预期一致。主要结论：PAMs在体内外均能抑制肝癌HepG2细胞的生长,通过实验探究,推测PAMs可通过不同层次的作用于HepG2细胞。一方面它可以通过下调FoxM1转录因子以及细胞凋亡相关因子,诱发癌症细胞凋亡,也可以激活TNF-α因子,直接杀死肿瘤细胞。另一方面,PAMs通过下调VEGF和上调IL-12的含量抑制肝癌移植瘤血管生成,同时下调MMP-2的表达量,共同抑制癌细胞的迁移。其分子作用机理尚需进一步实验探究。