珠美海棠[Malus zumi（Matsum）Reder]是毛山荆子、三叶海棠的杂交种,其抗逆性强、是一种优良的耐盐碱苹果砧木。多项滨海及内陆盐碱地的栽培试验证明,珠美海棠相对于其它某些耐盐植物具有较高的耐盐力,抗病能力强,并且具有较高的嫁接亲和性。2009年孟晓烨等从珠美海棠中分离了Na⁺/H⁺逆向转运蛋白基因,注册并分析了其表达特性（GeneBank accession number:GQ 503257）。在此基础上本实验室又分离到了其同源基因Mz₂NHX₁,进行测序、注册,并构建了pRI201-AN-GUS DNA-Mz₂NHX₁表达载体。本研究首次建立了超声波介导的珠美海棠遗传转化体系,同时建立了珠美海棠愈伤组织诱导和植株再生体系,将Mz₂NHX₁基因在珠美海棠中过表达,通过GUS染色、RT-PCR和实时荧光定量PCR检测,证明目的基因已经在珠美海棠中过量表达,获得17株转化苗,并初步分析了其抗氧化酶活性等生理指标,证明过表达苗抗氧化酶活性得到提高。研究结果显示较利于珠美海棠愈伤组织诱导的培养基为MS+6-BA 3.0mg/L+NAA0.1mg/L,较利于珠美海棠愈伤组织分化诱导培养基为MS+6-BA 2.0mg/L+NA A 0.01 m g/L,较适宜的卡那霉素筛选浓度为50mg/L,较优的超声波介导转化反应设置条件为:在80w的功率下,超声处理6s,间歇10s,20次循环。超声波介导Mz₂NHX₁基因转化珠美海棠后,通过器官分化途径诱导和抗性筛选获得珠美海棠再生植株,将获得的转化植株进行GUS组织化学染色和RT-PCR鉴定。结果显示:GUS染色和RT-PCR鉴定对阳性苗鉴定结果一致率为100%,GUS组织化学染色阳性的珠美海棠苗的RT-PCR结果扩增出了1635bp的目的条带,且凝胶电泳显示Mz₂NH X₁基因的表达量明显大于对照组。将RT-PCR鉴定后的转基因阳性苗进行实时荧光定量PCR,分析Mz₂NHX₁基因在转化苗中的表达量。实时荧光定量PCR结果显示珠美海棠转化植株中Mz₂NH X₁基因的表达量为对照组的6.21倍,对RT-PCR鉴定后转化率的统计分析结果显示本研究中超声波介导的转化效率为31.3%。将RT-PCR鉴定和荧光定量PCR测定后的转基因阳性苗在200mmoL/L的盐处理条件下培养三周后,结果显示转化苗植株较高,生长旺盛,且叶片无出现焦黄、枯皱等现象。对SOD（超氧化物歧化酶）活性的测定结果显示,转化苗SOD的活性约为对照组的2倍,说明转化植株细胞对活性氧、超氧自由基等过氧化物的清除能力较强。对POD（过氧化物歧化酶）活性的测定结果显示,转化苗中POD的活性约为对照组的1.3倍,POD的活性在植物细胞中反映了植物抗逆性的强弱,POD活性越高,说明植物的抗逆性越强。该结果说明转化苗的抗逆性较对照组强。对MDA（丙二醛）含量的测定结果显示,在相同的盐胁迫条件下,转化苗中的MDA含量约为对照组植株的50%。MDA为膜脂过氧化产物之一,反应了植物细胞膜系统的受损程度。研究结果显示转化苗中的膜脂过氧化物较少,说明其受盐胁迫的危害较轻。综合上述三个生理指标分析结果初步表明,过量表达Mz₂NHX₁基因的珠美海棠耐盐性提高。该研究结果为土壤盐渍化的生物改良和珠美海棠抗逆新材料的培育等提供了理论依据。