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研究背景：
近年来，人类免疫缺陷病毒（HumanImmunodeficiencyVirus，HIV）阴性肺隐球菌病（PulmonaryCryptococosis，PC）患者人数逐年增高，因其临床表现不典型，而且影像学表现难以和结核以及肺癌相鉴别，给诊断带来了困难，部分患者因误诊或延迟诊断进展为隐球菌性脑膜炎。目前主要确诊手段是病理活检，但肺隐球菌病早期胸部CT表现为外周小结节影，活检难度大且存在一定的风险，需要研发更多简单便捷的诊断方法。隐球菌胶体金（LateralFlowAssay，LFA）抗原检测敏感度和特异度较高，已经被用于肺隐球菌病的诊断，但目前缺乏胶体金抗原检测在肺泡灌洗液（BronchoalveolarLavageFluid，BALF）中的敏感性和特异性，以及是否适合早期诊断仍是未知的。因此，本研究利用丹娜公司新研发的高灵敏度的隐球菌胶体金抗原检测试剂，对比在血清和BALF中的检测敏感性和特异性，并对其在临床诊断中的应用价值进行评价。
研究目的：
评价隐球菌抗原检测在肺泡灌洗液中的敏感性和特异性；血清隐球菌抗原检测和肺泡灌洗液隐球菌抗原检测敏感性分别与肺部病灶大小的相关性，评价隐球菌抗原检测的临床应用价值，为临床早期诊断肺隐球菌病提供参考依据。
第一部分隐球菌抗原检测的敏感性和特异性
对象和方法：
本研究为前瞻性临床研究，研究的对象为临床确诊的肺隐球菌病患者，并排除HIV阳性的患者。入组的标准为：
根据2008年欧洲癌症研究和治疗组织/侵袭性真菌感染协助组和美国国立变态反应和感染病研究院真菌病研究组（EORTC/MSG）共识组制定的侵袭性真菌病修订定义，确诊患者均经组织病理学诊断。
排除标准：1、艾滋病患者，2、手术切除病灶患者，3、播散性隐球菌病患者，4、不接受此检查的患者。对照组的纳入标准为：由于已经有报道隐球菌胶体金抗原检测在非隐球菌疾病中存在交差反应，为了更好的检测隐球菌抗原检测的敏感性和特异性，本研究的对照组纳入的是非隐球菌感染的其他疾病，包括非隐球菌感染的其他肺部真菌病，细菌性肺炎，结缔组织病，肺结核，肺癌，特发性肺间质纤维化等。患者入组后，采集其临床标本，包括：血清和肺泡灌洗液。参照丹娜公司的隐球菌胶体金抗原检测试剂盒的说明书操作，分别检测血清和肺泡灌洗液中的隐球菌抗原水平；同时，使用隐球菌酶联免疫吸附试验（EnzymeLinkedImmuneSorbentAssay，ELISA）的方法分别检测血清和肺泡灌洗液中的隐球菌抗原水平。检测的结果采用SPSS16.0统计软件进行分析。P＜0.05具有统计学意义。
结果：
血清和肺泡灌洗液隐球菌胶体金抗原检测在诊断肺隐球菌病的敏感度分别是97%和95%，血清特异度为98.2%，肺泡灌洗液特异度为93%。ELISA法检测血清和肺泡灌洗液的敏感度分别是50%和36%，特异度分别是100%和100%。
小结：
隐球菌胶体金抗原检测在血清和肺泡灌洗液中均有较高的敏感度和特异度高，适合用于肺隐球菌病的诊断。
第二部分隐球菌胶体金抗原检测在临床诊断应用价值的评价
对象和方法：
本部分的研究对象主要为确诊和临床诊断的肺隐球菌病患者，确诊的标准如上文所述；临床诊断的标准为病理阴性，抗隐球菌治疗有效。排除的标准同上文所述。符合纳入标准者定期随访，住院期间收集血清和肺泡灌洗液，完善胸部CT检查，治疗后3个月、6个月、9个月收集血清，治疗后每3个月完善胸部CT及气管镜，收集肺泡灌洗液。时间窗±14天。收集以下资料：（1）一般情况：包括姓名、性别、年龄、住院号、住院时间等。（2）宿主因素：基础疾病、确诊时间及首次治疗时间。（3）临床表现、胸部CT影像学检查、微生物学、隐球菌抗原胶体金抗原检测结果及隐球菌酶联免疫吸附试验（EnzymeLinkedImmuneSorbentAssay，ELISA）隐球菌抗原检测结果。采用SPSS16.0统计软件进行分析。采用斯皮尔曼等级分析统计方法分析隐球菌抗原与肺部阴影直径之间的相关性。P＜0.05具有统计学意义。
结果：
1.分析血清和肺泡灌洗液胶体金检测与肺部阴影最大直径相关性：隐球菌抗原大小与肺部阴影最大直径之间呈正相关，血清抗原读数的相关性（r：0.581p＜0.001）高于肺泡灌洗液（r：0.253p：0.13）。在不同直径大小下，血和灌洗液隐球菌抗原检测的敏感度不同，当肺部阴影直径小于10mm时，肺泡灌洗液的检出率高于血清。
2.随访肺隐球菌病患者隐球菌抗原滴度水平变化：部分患者在治疗过程中隐球菌抗原滴度短暂升高后即下降，部分患者治疗过程中抗原滴度一直下降，未发现抗原数值升高患者。
小结：
1.血清胶体金抗原大小与肺部病灶大小正相关，而且在病灶直径小于10mm时，肺泡灌洗液中的检查敏感性较血清的高，提示肺泡灌洗中隐球菌抗原的检测有助于肺隐球菌病的早期诊断，尤其适用于不利于肺部活检的小病灶。
2.隐球菌胶体金抗原的变化水平与患者预后相关，提示隐球菌抗原的检测对病情监测以及疗效的评估有重要的辅助作用。
全文结论：
1.隐球菌胶体金抗原检测在血清和肺泡灌洗液中均有较高的敏感度和特异度高，适合用于肺隐球菌病的诊断。
2.血清胶体金抗原大小与肺部阴影大小正相关，肺泡灌洗中隐球菌抗原的检测有助于肺隐球菌病的早期诊断，尤其适用于不利于肺部活检的小病灶。
3.隐球菌抗原的检测对病情以及疗效的评估有重要辅助作用。
近年来，人类免疫缺陷病毒（HumanImmunodeficiencyVirus，HIV）阴性肺隐球菌病（PulmonaryCryptococosis，PC）患者人数逐年增高，因其临床表现不典型，而且影像学表现难以和结核以及肺癌相鉴别，给诊断带来了困难，部分患者因误诊或延迟诊断进展为隐球菌性脑膜炎。目前主要确诊手段是病理活检，但肺隐球菌病早期胸部CT表现为外周小结节影，活检难度大且存在一定的风险，需要研发更多简单便捷的诊断方法。隐球菌胶体金（LateralFlowAssay，LFA）抗原检测敏感度和特异度较高，已经被用于肺隐球菌病的诊断，但目前缺乏胶体金抗原检测在肺泡灌洗液（BronchoalveolarLavageFluid，BALF）中的敏感性和特异性，以及是否适合早期诊断仍是未知的。因此，本研究利用丹娜公司新研发的高灵敏度的隐球菌胶体金抗原检测试剂，对比在血清和BALF中的检测敏感性和特异性，并对其在临床诊断中的应用价值进行评价。
研究目的：
评价隐球菌抗原检测在肺泡灌洗液中的敏感性和特异性；血清隐球菌抗原检测和肺泡灌洗液隐球菌抗原检测敏感性分别与肺部病灶大小的相关性，评价隐球菌抗原检测的临床应用价值，为临床早期诊断肺隐球菌病提供参考依据。
第一部分隐球菌抗原检测的敏感性和特异性
对象和方法：
本研究为前瞻性临床研究，研究的对象为临床确诊的肺隐球菌病患者，并排除HIV阳性的患者。入组的标准为：
根据2008年欧洲癌症研究和治疗组织/侵袭性真菌感染协助组和美国国立变态反应和感染病研究院真菌病研究组（EORTC/MSG）共识组制定的侵袭性真菌病修订定义，确诊患者均经组织病理学诊断。
排除标准：1、艾滋病患者，2、手术切除病灶患者，3、播散性隐球菌病患者，4、不接受此检查的患者。对照组的纳入标准为：由于已经有报道隐球菌胶体金抗原检测在非隐球菌疾病中存在交差反应，为了更好的检测隐球菌抗原检测的敏感性和特异性，本研究的对照组纳入的是非隐球菌感染的其他疾病，包括非隐球菌感染的其他肺部真菌病，细菌性肺炎，结缔组织病，肺结核，肺癌，特发性肺间质纤维化等。患者入组后，采集其临床标本，包括：血清和肺泡灌洗液。参照丹娜公司的隐球菌胶体金抗原检测试剂盒的说明书操作，分别检测血清和肺泡灌洗液中的隐球菌抗原水平；同时，使用隐球菌酶联免疫吸附试验（EnzymeLinkedImmuneSorbentAssay，ELISA）的方法分别检测血清和肺泡灌洗液中的隐球菌抗原水平。检测的结果采用SPSS16.0统计软件进行分析。P＜0.05具有统计学意义。
结果：
血清和肺泡灌洗液隐球菌胶体金抗原检测在诊断肺隐球菌病的敏感度分别是97%和95%，血清特异度为98.2%，肺泡灌洗液特异度为93%。ELISA法检测血清和肺泡灌洗液的敏感度分别是50%和36%，特异度分别是100%和100%。
小结：
隐球菌胶体金抗原检测在血清和肺泡灌洗液中均有较高的敏感度和特异度高，适合用于肺隐球菌病的诊断。
第二部分隐球菌胶体金抗原检测在临床诊断应用价值的评价
对象和方法：
本部分的研究对象主要为确诊和临床诊断的肺隐球菌病患者，确诊的标准如上文所述；临床诊断的标准为病理阴性，抗隐球菌治疗有效。排除的标准同上文所述。符合纳入标准者定期随访，住院期间收集血清和肺泡灌洗液，完善胸部CT检查，治疗后3个月、6个月、9个月收集血清，治疗后每3个月完善胸部CT及气管镜，收集肺泡灌洗液。时间窗±14天。收集以下资料：（1）一般情况：包括姓名、性别、年龄、住院号、住院时间等。（2）宿主因素：基础疾病、确诊时间及首次治疗时间。（3）临床表现、胸部CT影像学检查、微生物学、隐球菌抗原胶体金抗原检测结果及隐球菌酶联免疫吸附试验（EnzymeLinkedImmuneSorbentAssay，ELISA）隐球菌抗原检测结果。采用SPSS16.0统计软件进行分析。采用斯皮尔曼等级分析统计方法分析隐球菌抗原与肺部阴影直径之间的相关性。P＜0.05具有统计学意义。
结果：
1.分析血清和肺泡灌洗液胶体金检测与肺部阴影最大直径相关性：隐球菌抗原大小与肺部阴影最大直径之间呈正相关，血清抗原读数的相关性（r：0.581p＜0.001）高于肺泡灌洗液（r：0.253p：0.13）。在不同直径大小下，血和灌洗液隐球菌抗原检测的敏感度不同，当肺部阴影直径小于10mm时，肺泡灌洗液的检出率高于血清。
2.随访肺隐球菌病患者隐球菌抗原滴度水平变化：部分患者在治疗过程中隐球菌抗原滴度短暂升高后即下降，部分患者治疗过程中抗原滴度一直下降，未发现抗原数值升高患者。
小结：
1.血清胶体金抗原大小与肺部病灶大小正相关，而且在病灶直径小于10mm时，肺泡灌洗液中的检查敏感性较血清的高，提示肺泡灌洗中隐球菌抗原的检测有助于肺隐球菌病的早期诊断，尤其适用于不利于肺部活检的小病灶。
2.隐球菌胶体金抗原的变化水平与患者预后相关，提示隐球菌抗原的检测对病情监测以及疗效的评估有重要的辅助作用。
全文结论：
1.隐球菌胶体金抗原检测在血清和肺泡灌洗液中均有较高的敏感度和特异度高，适合用于肺隐球菌病的诊断。
2.血清胶体金抗原大小与肺部阴影大小正相关，肺泡灌洗中隐球菌抗原的检测有助于肺隐球菌病的早期诊断，尤其适用于不利于肺部活检的小病灶。
3.隐球菌抗原的检测对病情以及疗效的评估有重要辅助作用。