LPS通过抑制PP2Ac的表达促进胰腺癌细胞的侵袭

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目的:炎症微环境在胰腺癌的演进过程当中起着重要作用。有研究发现,炎症刺激可以抑制肿瘤抑制因子蛋白磷酸酶2A(protein phosphatase2A, PP2A)的表达。本研究中,采用脂多糖(Lipopolysaccharide, LPS)作为炎症刺激方式,研究炎症对胰腺癌细胞PP2A催化性C亚基(PP2Ac)表达的影响及对细胞侵袭转移能力的影响。方法:1、收集11例经病理确诊的胰腺癌标本(包括癌组织和癌旁组织),检测标本和7类胰腺癌细胞系PP2Ac mRNA的表达水平;2、胰腺癌细胞SW1990经LPS处理后检测PP2Ac表达水平及侵袭能力;3、构建PP2Acα表达质粒pIRES2-EGFP-PP2Acα,通过瞬时转染,构建PP2Ac过表达胰腺癌细胞SW1990;4、将胰腺癌细胞SW1990分空载体组和PP2Ac过表达组,组内再分对照组和LPS处理组,分别检测各组细胞的侵袭能力,通过比较探讨LPS对细胞侵袭力的影响是否通PP2Ac依赖性机制。5、PP2Ac mRNA和蛋白表达水平通过Real time-PCR和Western Blot检测;胰腺癌细胞侵袭能力通过Transwell侵袭实验检测。结果:1、胰腺癌组织中PP2Ac mRNA的表达水平显著低于癌旁组织(P <0.01),胰腺癌细胞系中PP2Ac mRNA也呈低水平表达。2、LPS作用后胰腺癌细胞SW1990PP2Ac mRNA的表达水平较对照组下降(P <0.01);且PP2Ac蛋白表达水平也下降。3、LPS处理后胰腺癌细胞SW1990穿过聚碳酸酯膜的细胞数较对照组增多(P <0.01)。4、PP2Acα表达质粒pIRES2-EGFP-PP2Acα瞬时转染入SW1990细胞后PP2Ac蛋白表达水平较对照组和空载体组升高。5、空载体组中LPS处理组中穿过聚碳酸酯膜的细胞数较对照组增加(P <0.01);PP2Ac过表达组中LPS处理组的细胞数与对照组之间差异无统计学意义(P>0.05);空载体组与PP2Ac过表达组的诱导倍数之间有显著性差异(P <0.01)。结论:LPS可以通过抑制PP2Ac的表达促进胰腺癌细胞的侵袭。
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