本研究旨在对采自内蒙古呼和浩特和阿拉善地区疑似羊痘发病羊的病料进行病毒的分离鉴定及生物学特性研究。利用羔羊睾丸细胞、猴胚胎肾上皮细胞、非洲绿猴肾细胞对病毒进行分离和培养,通过动物回归实验、组织病理学切片的观察、透射电镜观察、PCR鉴定等方法进行病毒的鉴定,并参照GenBank中羊痘病毒P32基因序列,设计并合成1对特异性引物,成功地对呼和浩特分离株和阿拉善分离株的P32基因进行克隆、测序,并与多株参考毒株进行同源性比对分析。结果显示,两株病毒悬液在羔羊睾丸细胞、猴胚胎肾上皮细胞和非洲绿猴肾细胞上连续培养4代后,可出现稳定的细胞病变；实验动物感染病毒分离株后,临床症状为典型的羊痘症状；组织病理学切片中观察到羊痘病毒嗜酸性包涵体、梭形的羊痘细胞;将病毒悬液制成负染切片和超薄切片,在透射电镜下观察到典型的痘病毒粒子：通过DNASTAR软件将两株病毒的测序结果与参考毒株进行同源性比对,呼和浩特分离株与参考株同源性为97.5%～99.4%,阿拉善分离株与参考株同源性为98.00%～99.9%,两株病毒分离株之间的同源性为99.3%,系统进化树结果表明两株病毒与羊痘病毒亲缘性较近。综合所有实验结果表明,本研究中的病毒分离株为羊痘病毒,并命名为CaPV strain Hohhot2015和CaPV strain ALashan2015。