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目的观察山茱萸总皂苷对人白血病K562细胞增殖影响,分析山茱萸总皂苷对K562细胞凋亡的影响及其分子机制,为进一步探讨TSCO抗肿瘤提供参考依据。方法(1)乙醇回流法提取山茱萸总皂苷,HPD-100大孔吸附树脂对提取液纯化;(2)MTT法观察TSCO对体外培养的K562细胞的增殖抑制作用;(3)Hoechst33342/PI荧光染色法,DNA琼胶糖凝胶电泳法检测TSCO对K562细胞的诱导凋亡作用;(4)比色法测定凋亡相关蛋白Caspase3活性;Western Blot法检测K562细胞Bax和Bcl-2蛋白的表达情况。结果(1)山茱萸总皂苷能够显著抑制K562细胞的增殖,且随着药物浓度(12.5、25、50、100和200μg/mL)增大和培养时间(24h、48h和72h)的延长,山茱萸总皂苷对K562细胞活性的抑制作用逐渐增强;(2)12.5、25、50、100和200μg/mL的山茱萸总皂苷处理72h后,K562细胞出现典型凋亡的三期形态学改变,可见胞体缩小、核染色质聚集、胞浆浓缩、核固缩、核碎裂,还可见膜包裹的凋亡小体;测得细胞凋亡率随着药物的浓度的增大而升高;(3)DNA琼脂糖凝胶电泳显示:12.5、25、50、100和200μg/mL山茱萸总皂苷作用K562细胞72h后,可诱导K562细胞产生凋亡细胞的DNA梯形条带;(4)酶标法检测到TSCO作用72h后,K562细胞的Caspase-3活性明显增高;(5)Western-blot显示:12.5、25、50、100和200μg/mL山茱萸总皂苷作用K562细胞72h后,Bax的表达升高、Bcl-2的表达下降。结论(1)山茱萸总皂苷能抑制K562细胞生长,促进K562细胞凋亡;在一定剂量范围内,山茱萸总皂苷的作用随着作用时间和药物浓度的增加而增强;(2)山茱萸总皂苷诱导K562细胞凋亡的作用可能与Bax、Caspase3的表达增加,Bcl-2的表达下降有关。