三七总皂苷的免疫佐剂活性成分研究

被引量 : 0次 | 上传用户:op0034
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
三七为五加科植物三七Panax notoginseng(Burk.)F.H.Chen的干燥根,是著名的传统中药,具有止血、散瘀、消肿、止痛等功效。近年来用于治疗冠心病、糖尿病、抗心绞痛、抗血栓等。三七由于含有与同属植物人参(Panax ginseng C.A.Meycr)相似的达玛烷型三萜皂苷类成分,加之其总皂苷在耐缺氧、抗衰老、提高机体免疫力等方面的药理作用显著优于人参总皂苷,因而引起国内外药学家的广泛重视。本课题应用现代天然药物化学技术及免疫学方法,以免疫佐剂活性评价为导向,对三七总皂苷中的免疫佐剂活性成分进行筛选,分离得到7个具有免疫活性的皂苷,并采用化学方法和包括ESI-MS、1H-NMR、13C-NMR、1H-1H COSY、HMQC及HMBC谱等多种光谱技术确定化学结构,其中三七皂苷U为新化合物,人参皂苷Rh4为首次从三七中分离得到。 1.提取与分离 三七干燥块根用70%乙醇回流提取,乙醇提取物依次用乙醚、水饱和正丁醇萃取后,经大孔吸附树脂得精制三七总皂苷。三七总皂苷经硅胶柱色谱、Rp-18柱色谱及半制备HPLC分离、纯化,得到7个皂苷化合物。 2.结构测定 通过化学方法和ESI-MS、1H-NMR、13C-NMR、HMBC及HMQC等光谱技术分析测定,化台物Ⅰ~Ⅶ的结构分别被确定为20(s)-原人参三醇-20-O-β-D-吡喃葡萄糖(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷、20(s)-原人参三醇-Δ20(22),24(25)-二烯-6-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(人参皂苷-Rh4)、20(s)-原人参三醇-6-O-β-D-吡喃木糖(1→2)-β-D-吡喃葡萄糖-20-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(三七皂苷-R1)、20(s)-原人参三醇-6-O-α-L-吡喃鼠李糖(1→2)-β-D-吡喃葡萄糖-20-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(人参皂苷-Re)、20(s)-原人参二醇-3-O-β-D-吡喃葡萄糖(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖-20-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(三七皂苷-K)、20(s)-原人参二醇-3-O-β-D-吡喃葡萄糖(1→2)-β-D-吡喃葡萄糖-20-O-β-D-吡喃葡萄糖(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷(人参皂苷-Rb1)和20(s)-原人参三醇-6-O-β-D-吡喃葡萄糖-20-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(人参皂苷-Rg1)。其中化合物Ⅰ为新化合物,并命名为三七皂苷-U;人参皂苷-Rh4,系首次从植物三七中分离得到。 3.溶血性试验 采用比色法测定7个皂苷化合物引起兔红细胞50%溶血浓度(HD50值),结果表明:7个化合物的HD50值均大于300μg/ml,溶血性均显著小于Quil A(P<0.001),后者的HD50值为19.8±0.57μg/ml。七种皂苷中以三七皂苷K的溶血性最大,人参皂苷Re的溶血性最小。渤江人学/Nj关放之三古澎宕另户公夕夕全疫岌芳夕片于理戒分云沙乡万4.体外对小鼠脾淋巴细胞增殖反应的影响 QuilA、人参皂普Rbl、Rh4和三七皂昔U(0.01一10.0林留扣1),人参皂普Rg!、Re、三七皂普K、RI(0 .1一10.0林留ml)体外均能显著或极显著促进ConA诱导的小鼠T淋巴细胞增殖反应护<0.05,p<0.01或尸<0.001)。人参皂普Rb,和三七皂普U(0.01一10.0林g/ml),Qui1A(0.01、0.1林留nll)、人参皂普Rll月(1.0、10.0协g/ml)、Rg;、Re(0.1一10.0林留ml)、三七皂普K(0.01一1.0雌/ml)、R、(0 .1、1.0林留ml)体外对LPS诱导小鼠B淋巴细胞增殖反应亦均有显著或极显著促进作用(P<0.05,尸<0.01或尸<0.001)。5.对OVA受免小鼠脾淋巴细胞增殖反应的影响 QuilA、人参皂普Rg,、Re(10,25林g),人参皂普Rbl和三七皂普Rl(25,50林g),三七皂营K(25林g)体内均能显著或极显著促进conA诱导的ovA受免小鼠T淋巴细胞增殖反应伊<0.05,P<0.ol或尸<0.001)。Al(OH):和人参皂普R场对conA诱导的小鼠T淋巴细胞增殖反应作用不显著。人参皂营Rbl、Rh4和三七皂营K(10,25,50林g),Qtu1A、人参皂营Re(一。,25林g),三七皂普RI(25,50协g),人参皂昔Rg;(25林g)体内对LpS诱导的oVA受免小鼠B淋巴细胞增殖反应亦均有显著或极显著促进作用(P<0.05,P<0.ol或P<0.ool)。ovA诱导的小鼠B淋巴细胞增殖反应也可被QuilA、人参皂普Rb,和三七皂普K、R.(10,25,50雌),人参皂着Re(10,25卜g),人参皂昔Rgl(25,50协g),人参皂普R五4(25协g)显著或极显著增强 仁P<0 .05,P<0.01或P<0.001)。6.对OVA受免小鼠血清中特异性抗体效价的影响 QuilA、人参皂普Rb】、Rgl、Re(10,25,50林g),三七皂普K、R一(10,25协g),人参皂营Rll4(25陀)均能显著或极显著提高ovA受免小鼠血清中OVA特异性lgG抗体效价(P<0 .05,尸<。.01或P<0.001)。人参皂昔Rb一、Rg:、Re和三七皂普K(10,25,50林g),QuilA(10,25林g),三七皂普R,(25,50协g),人参皂普Rh4(25林g)均能显著或极显著提高OVA受免小鼠血清中o认特异性IgGI抗体效价护<0.05,P<O.ol或P<o.ool)。以QllilA、人参皂普Rb,、Re(10,25,50卜g),三七皂普R!(10,25林g),人参皂营Rgl(25,50林g),人参皂昔Rh4和三七皂普K(25雌)为佐剂免疫组小鼠血清中oVA特异性IgGZb抗体效价显著或极显著高于单独ovA 免疫对照组(p<0.05,P<o.01或六0.001)。 综上所述,人参皂昔Rbl、Rgl、R。、Rh4和三七皂普K、RI不仅溶血性较小,而且 均可显著或极显著增强OVA受免小鼠的细胞免疫和体液免疫应答反应。这在一定程度上也 进一?
其他文献
天燃气作为我国能源结构的重要组成部分,被广泛应用于我国人民生产生活中。大量燃气管道施工,给人们的生产生活带来了极大的便利,但随之而来的燃气管道施工安全管理问题也受
随着飞行活动需求的持续快速增长和空域资源使用矛盾的日益凸显,全局飞行流量协同优化已成为减少飞行延误、降低飞行危险、确保空域运行安全的一个重要手段。空中交通管理作
我国“三农”问题的核心是农民问题,而农民问题的核心是农民增收问题。为此,要正确认识农民收入的基本形势,分析农民增收面临的新问题,积极探索建立农民增收的长效机制,为农
目的研究中青年缺血性脑卒中与睡眠呼吸暂停综合征(SAS)、腹围的相关性。方法通过临床及既往病案室病例,收集本院2017年2月至2018年2月纳入的120例中青年缺血性脑卒中患者病
毛泽东为了纠正党内的教条主义 ,发表了《反对本本主义》 ,强调马克思主义的普遍真理必须同中国革命的实际相结合 ;遵义会议是中国共产党独立自主地运用马克思列宁主义解决中
<正>教师教育课程作为教师学问的重要内容,是教师专业发展过程中的重要支撑。然而,教师教学国际调查(TALIS)在最新一轮的调查中发现,教师教育课程设置未能满足教师的多样化需
艾本(伊班膦酸钠注射液)是由河北医科大学生物医学工程中心生产的最新一代,即第三代双膦酸盐(Bisphosphonates,BPs)药物。具有高效、低毒和使用方便等优点,是目前国际上预防和治疗
目的:考察不同炮制品对紫菀浸出物及部分活性成分的影响,以期为科学评价中药不同炮制方法提供依据。方法:采用生紫菀、蜜紫菀、炒紫菀、醋紫菀、酒紫菀和蒸紫菀六种紫菀炮制
基于人工湿地污水处理系统的应用研究现状,本研究结合工程实践石岩人工湿地和甘坑人工湿地进行探索研究,内容包括前处理、不同填料、不同植物、不同深度、回流系统等对处理效果
为了实现高速公路改扩建期间的安全交通组织,解决施工期间的交通流转移将会造成高速公路通行效率低以及交通安全等难题,以理论结合实际项目的观念,依托江西省某高速公路改扩