益气活血方治疗大鼠脊髓型颈椎病的实验研究

来源 :南京中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:peterkong
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目的: 采用急性毒性试验评价临床经验方“益气活血方"的安全性,采用耳廓肿试验、醋酸扭体法研究该方的抗炎镇痛作用,采用大鼠脊髓型颈椎病模型研究该方对大鼠受损脊髓神经功能恢复的影响,阐明其促进脊髓功能恢复的相关作用机制,为中药“益气活血方”的临床应用提供理论基础及指导。方法: 1、20只ICR小鼠随机选取5只为对照组,余15只为实验组,采用最大给药量的方法研究益气活血方的急性毒性反应;2、以二甲苯致小鼠耳肿胀法以及醋酸扭体法等作为基础研究方法,以高、中、低浓度益气活血方灌胃小鼠5天,研究该方的抗炎镇痛效果;3、60只SD大鼠,随机选取10只作为假手术组:仅暴露椎板,未造成脊髓压迫,以生理盐水(Normal Saline, NS)进行灌胃;其余的SD大鼠采用“自体第七颈椎棘突椎间移植法”制造大鼠脊髓型颈椎病模型,术后第1天根据脊髓功能的评分将其分为:A组:造模后,以高、中、低浓度益气活血方进行灌胃;B组:造模后,以颈复康进行灌胃;C组:造模后,以NS进行灌胃。造模后对大鼠进行为期4周的连续灌胃,每周均采用改进Rivaling的斜板试验、改良Tarlov评分、BBB评分等方法评估大鼠运动功能的恢复程度。灌胃结束后,采用HE染色法观察受损脊髓组织的形态学改变和ELISA方法测定大鼠受损节段中SOD、MDA、PGE2、PLA2的含量。结 果: 1、小鼠的日最大给药量是临床成人日用量的315倍,相当于生药的892.5g·kg-1,在该剂量下未见明显毒性反应,7天内未出现动物死亡现象;2、发现高、中、低浓度的益气活血方均能显著抑制二甲苯致小鼠耳肿胀的作用,能减轻冰醋酸致小鼠扭体反应次数。3、行为学观察:高、中、低浓度益气活血方及颈复康均能显著增加Rivaling的斜板试验的平均度数、Tarlov评分、BBB评分,与NS组相比效果显著(P<0.05)。4、HE染色:受损脊髓组织形态学的观察结果显示,中药高、中、低浓度组以及颈复康组的受损脊髓组织内均可见胶质瘢痕和空洞形成,且空洞总面积均明显小于NS组。5、ELISA方法:通过检测大鼠受损脊髓组织中的炎症因子发现,高、中浓度益气活血方及颈复康均能显著降低受损脊髓组织内PGE2的含量(P<0.05);高、中、低浓度益气活血方及颈复康均能显著减低受损脊髓组织内PLA2的含量(P<0.05);高、中、低浓度益气活血方及颈复康颗粒均能显著增加大鼠受损脊髓组织内SOD的含量(P<0.05);高、中浓度的益气活血方以及颈复康颗粒均能显著降低脊髓组织内的MDA含量(P<0.05);低浓度益气活血方亦可降低其组织内PGE2、 MDA含量,但与对照组相比,无显著性差异(P>0.05)。结论: 益气活血方是安全的,并具有明显的抗炎镇痛作用,且能通过提高受损脊髓组织细胞中氧自由基的清除率以及抑制受损脊髓组织的炎症反应来促进脊髓功能的恢复。
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