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目的：构建Peroxiredo xin6-穿膜肽(Prdx6-11R)融合蛋白的原核表达系统，诱导及表达Prdx6-11R融合蛋白，研究该融合蛋白在体外对人角膜上皮细胞和体内对肝、肾组织的穿膜作用，对11R促进Prdx6进入角膜细胞发挥抗氧化的作用进行研究，为后续Prdx6的功能研究及构建新型的偶联药物传递系统奠定基础。 方法：以人附睾cDNA文库为模板，扩增Prdx6部分序列：A序列；设计合成包含11R的序列：B序列；最后连接A序列和B序列形成Prdx6-11R序列；用PCR技术扩增Prdx6-11R基因和Prdx6基因（对照），扩增产物连入pET32b载体，构建成重组质粒pET32b/Prdx6-11R和pET32b/Prdx6。将重组质粒转入大肠杆菌 OrigamiB(DE3)中，用IPTG诱导、表达Prdx6-11R融合蛋白及Prdx6蛋白，目的蛋白基本为完全可溶性表达。菌体经超声法裂解、低温离心，所得含目的蛋白的破碎菌液上清经Ni亲和层析柱纯化，并去除内毒素。该融合蛋白一方面与角膜上皮细胞共孵育，另一方面经腹腔注入小鼠腹腔体内，用荧光显微镜观察Prdx6-11R融合蛋白进入角膜上皮细胞以及肝、肾组织的情况。将高剂量的该融合蛋白和角膜细胞共孵育，观察高剂量融合蛋白的细胞毒性；将融合蛋白、双氧水（H2O2）与角膜上皮细胞共孵育，通过MTT比色法检测角膜上皮细胞的存活率，对Prdx6-11R融合蛋白降低H2O2对角膜上皮细胞破坏作用进行研究。 结果：重组质粒测序结果证实扩增的Prdx6-11R基因、Prdx6基因与预期的序列一致，证明重组质粒pET32b/Prd x6-11R、pET32b/Prdx6构建成功。Prdx6-11R融合蛋白原核表达菌株所表达的Prdx6-11R融合蛋白，经纯化后纯度达95％以上，浓度为2mg/mL以上。Prdx6-11R融合蛋白能穿入角膜上皮细胞和肝、肾组织，穿细胞膜效率与浓度和时间相关；Prdx6-11R可抑制H2O2对角膜上皮细胞的杀伤作用，对氧化作用引起的角膜上皮细胞损伤有一定的保护作用。 结论：成功构建了重组表达质粒pET32b/Prdx6-11R，并能高效地表达Prdx6-11R融合蛋白，表达的融合蛋白具有Prdx6的活性，纯化的Prdx6-11R融合蛋白具有穿入人角膜上皮细胞和小鼠肝、肾组织的能力，并能显著提高角膜上皮细胞的抗氧化能力。