杜仲治疗骨质疏松的有效成分筛选及质量控制的研究

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杜仲是杜仲科植物杜仲Eucommia ulmoides Oliv的干燥树皮,性甘、温,归肝、肾经,具有补肝肾、强筋骨、安胎的功效,临床上主要用于治疗肝肾不足,腰膝酸痛,筋骨无力,头晕目眩,妊娠漏血,胎动不安等症。历代医家把它广泛应用于补肾健骨的方剂中,现代药理研究也表明杜仲有抗骨质疏松的作用。针对杜仲治疗骨质疏松的物质基础不够清楚,本论文对杜仲治疗骨质疏松的有效部位和有效成分进行了筛选,同时对杜仲有效成分含量测定方法和指纹图谱的建立进行了研究。本论文的第一章采用维甲酸致骨质疏松大鼠模型和氢化可的松致阳虚小鼠模型,对杜仲治疗骨质疏松症的有效部位进行筛选。实验结果表明杜仲正丁醇部位能提高维甲酸致骨质疏松模型大鼠的骨密度,降低骨质疏松模型大鼠ALP活性;提高阳虚模型小鼠肾上腺指数、胸腺指数、负重游泳时间,为杜仲治疗骨质疏松的有效部位。采用柱层析等方法对杜仲正丁醇部位进行了化学成分的研究,得到六个单体化合物,分别为京尼平苷酸、桃叶珊瑚苷、绿原酸、京尼平苷、葡萄糖和蔗糖。采用体外成骨细胞和破骨细胞实验对正丁醇部位的五个单体化合物:桃叶珊瑚苷、京尼平苷、京尼平苷酸、绿原酸、松脂醇二葡糖苷进行活性检测。实验结果显示桃叶珊瑚苷、松脂醇二葡萄糖苷、京尼平苷、京尼平苷酸为杜仲治疗骨质疏松的有效成分。本论文的第二章以京尼平苷酸、绿原酸、松脂醇二葡糖苷为指标性成分,建立了杜仲HPLC含量测定的方法,并对11批药材进行了测定。药材中京尼平苷酸、绿原酸、松脂醇二葡萄糖苷的含量分别为0.039%-0.124%,0.013%-0.199%、0.106%-0.294%.同时建立了11批不同产地杜仲药材指纹图谱,确定共有峰12个,对其中的京尼平苷酸、绿原酸、松脂醇二葡萄糖苷、京尼平苷色谱峰进行了确认,11批药材的指纹图谱相似度在0.82-0.96之间。同时进行杜仲HPLC指纹图谱分析和多有效成分含量测定方法的建立为更全面合理科学地对杜仲药材质量的控制和评价提供了技术支撑。
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