IMS-PCR检测食品中的单增李斯特菌

来源 :大连工业大学 | 被引量 : 4次 | 上传用户:lujundehao
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
单增李斯特菌是自然界中一种常见的致病菌,能感染人类和动物;李斯特菌病是具有高致死率的一种疾病。因此,采用科学的方法检测食品中是否含有单增李斯特菌就显得非常重要。本文利用IMS-PCR法能快速、简便地从食品中检测出单增李斯特菌。免疫磁珠法(Immunomagnetic Separation简称IMS法或Listertest法)是利用抗原抗体反应的原理,做单增李斯特菌的特异性和敏感性实验;PCR(Polymerase Chain Reaction)法是针对单增李斯特菌的iap基因(编码p60蛋白)设计特异性引物,进行PCR扩增反应;做单增李斯特菌的特异性和敏感性实验。通过对这两种方法的分析和比较,建立IMS-PCR法,利用PCR法的引物,做单增李斯特菌的特异性和敏感性实验。同时,国标法(检测的标准方法)和实时荧光定量PCR法(试剂盒)作为IMS-PCR法的对照,同IMS-PCR法实验结果进行分析和比较。IMS法:能快速捕集细菌,在培养液中进行增菌(37℃14~18h);通过溶血反应和鼠李糖反应确认是否为单增李斯特菌,需要3~7天,敏感性能达到10-7。PCR法:从食品中获取单增李斯特菌到进行增菌培养要3~5天,提取细菌基因组DNA,并对其进行了PCR扩增,结果得到片段的长度为230bp,需要4h就得出结果,敏感性能达到10-5。IMS-PCR法:从快速捕集细菌到进行增菌培养,再经PCR扩增后得到片段长度为230bp;只需在1天内就能检测出单增李斯特菌,缩短了检测的时间;同时提高单增李斯特菌检测的特异性和敏感性。IMS-PCR法的实验结果与国标法和实时荧光定量PCR法(试剂盒)法的结果相符,然而它比国标法简便、快速、灵敏度高,比实时定量PCR(试剂盒)法价格低;因此从经济和实用性上,IMS-PCR法有很好的应用前景和研究价值。
其他文献
目的观察药物刺激后抗结核药物超敏反应患者外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)中CD69、CD40L的表达变化,与药物激发试验结果比较,评价其在识别此
文章首先针对遥感卫星数据传输中存在的问题,提出了自适应数据传输的概念;然后对最近快速发展的卫星电视广播标准DVB-S2进行了简要介绍,并讨论了其核心技术-自适应编码调制技
大麦作为我国主要的经济作物,种植面积越来越大。大麦可作为饲用,食用和生产用图,具有较高的价值。我国是个啤酒消费大国,每年的人均啤酒消费量都在不断增长,但距离世界平均水平还
随着现代社会的快速发展,通信网络已经成为了关系社会发展的重要基础设施,尤其是光纤通信网络的发展和应用,使更新技术的发展进入了一个崭新的阶段。通信线路的建设工作不仅
藏族唐卡作为中华传统民族文化的特殊载体,具有极高的艺术研究价值和保存价值。作为非物质文化遗产的唐卡,凭借其独特的审美观念影响着建筑艺术和其他民间美术。如何保护唐卡
随着林业资源的大量开发,我国木材资源的供需矛盾日益突出,利用竹材热压加工代木板材的工艺,成为减缓这一矛盾的有效途径。竹材的热压是自动化程度要求较高的一个环节,其加工
目的:探讨自行研制的"灯笼骨架形"记忆合金椎体成形架治疗老年胸腰椎压缩骨折的安全性及优势。方法:将自行研制的"灯笼骨架形"记忆合金椎体成形架经椎弓根微创置入压缩的胸腰
高违约率已经成为目前订单农业面临的重要问题。由于面临对方违约,另一方可能有多种选择,现有文献关于违约后签约方的行为反应从两个极端理论假设进行了推演。本文遵循Volker
为深入揭示我国图书情报学的发展变化,为该研究领域的论文选题、科研立项和学科规划提供参考信息和决策依据。本文采用词频分析法和共词分析法,对2001-2010十年间图书情报学
顾名思义,机器翻译就是用电子计算机来进行语言的翻译。它是结合语言学、数学和计算机等科学的一门边缘学科。机器翻译从实验室走向市场,在经历了几十年的曲折发展之后,出现了理