研究认为,表观遗传修饰重编程不充分是导致体细胞核移植(SCNT)胚胎发育异常的主要原因之一。因此,本实验通过比较牛体外受精(IVF)和SCNT附植前胚胎DNA甲基化及组蛋白H3K9me3的动态变化,旨在阐明牛SCNT附植前胚胎的表观遗传修饰重编程情况。结果显示:(1)牛IVF附植前胚胎全基因组甲基化修饰经历了一个典型的去甲基化与再甲基化的动态变化过程。TET3是TET基因家族在牛早期胚胎中主要表达的成员。satellite I、α-satellite、POU5F1和NANOG基因经历了明显的DNA去甲基化过程,而印记基因H19对DNA去甲基化过程表现出一定的抵抗能力,SOX2和CDX2基因启动子区域始终处于低甲基化修饰状态。H3K9me3在牛IVF附植前胚胎中一直维持着较高的信号强度;(2)与IVF附植前胚胎相比,牛SCNT附植前胚胎中始终维持着较高的5m C含量,并且无明显的变化趋势。同时,未发现5hm C信号的存在。特定基因位点同样表现出异常的DNA甲基化修饰:satellite I、α-satellite、POU5F1和NANOG基因均表现出不完全的DNA去甲基化,印记基因H19则表现出过度的去甲基化。Vitamin C的添加可改善satellite I、α-satellite和H19基因的甲基化修饰,但对POU5F1和NANOG并没有体现出有利的影响,对SOX2和CDX2则无显著影响;(3)DNA甲基转移酶抑制剂(RG108)的添加显著降低了牛孤雌胚胎发育的囊胚率和特定基因位点(NANOG、satellite I和α-satellite)的DNA甲基化修饰水平,但同时显著增加了囊胚期的凋亡细胞数和促凋亡基因BAX的表达。