白介素-6受体在小脑间位核的表达及白介素-6对间位核神经元放电活动的影响

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目的:我们实验室最近的研究表明,细胞因子白介素-6(interleukin-6,IL-6)及其受体在小脑皮层神经元中有表达,且IL-6能保护小脑颗粒神经元抵抗谷氨酸(glutamate,Glu)诱导的神经元凋亡。然而,小脑深部核团的神经元是否也表达IL-6受体,且IL-6能否影响小脑核团神经元的活动,目前尚未见报道。为此,本研究一方面揭示IL-6受体在小脑间位核(imerpositus nucleus,IN)神经元中的表达,另一方面探讨IL-6对间位核神经元放电活动的影响及其受体机制,以拓展细胞因子在神经免疫调节中作用的知识和认识。方法:用卵白素-生物素结合的辣根过氧化物酶复合物(avidin biotin horseradish oeroxidase complex,ABC)免疫组织化学法检测大鼠小脑间位核中IL-6结合受体(IL-6 binding receptor,IL-6R)的表达;并用逆转录聚合酶链式反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)法检测间位核神经元内IL-6R mRNA以及IL-6信号转导蛋白gp130mRNA的表达。制备大鼠小脑脑片,利用离体脑片神经元单位放电细胞外记录技术,记录小脑间位核神经元的自发放电,并观察其对IL-6刺激的反应。结果:在小脑间位核中有大量IL-6R免疫反应阳性的神经元。间位核神经元具有IL-6R mRNA以及gp130 mRNA的表达。在记录的41个间位核神经元的单位放电中,其自发放电频率从16.0spikes/s到85.3 spikes/s,平均放电频率为42.4±14.6 spikes/s。用含IL-6(10 ng/ml)的人工脑脊液(artificial cerebrospinal fluid,ACSF)灌流脑片后,在记录的41个间位核神经元的单位放电中,有17个(41.4%)神经元的放电频率明显增加,反应的潜伏期为5.1±1.6 min,到达作用的高峰期为41.0±7.8 min。另外24个(58.6%)神经元在记录的时间内(3h)不出现反应。在3个间位核神经元单位放电上,单独用含抗IL-6R抗体(0.2μg/ml)的ACSF灌流脑片,神经元的放电无变化;而在另外3个对IL-6(10 ng/ml)表现出兴奋反应的神经元上,给予抗IL-6R抗体(0.2μg/ml),然后再用IL-6处理,神经元对IL-6的兴奋反应即被阻断。结论:小脑间位核神经元能表达IL-6的结合受体IL-6R和信号转导蛋白gp130;IL-6对小脑间位核的部分神经元具有兴奋作用,该作用可能由IL-6R介导。目的:应用细胞外记录单位放电技术,在离体大鼠小脑脑片上观察谷氨酸对间位核神经元单位放电的影响。方法:制备大鼠小脑脑片,细胞外记录小脑间位核神经元单位放电,并观察谷氨酸对大鼠小脑间位核神经元单位放电的影响。结果:谷氨酸对小脑间位核神经元放电有兴奋作用,且这种兴奋作用不能被低Ca2+/高Mg2+的人工脑脊液(artificial cerebrospinal fluid,ACSF)所阻断。结论:谷氨酸对小脑间位核神经元单位放电的兴奋作用可能是通过直接激活间位核神经元表面的谷氨酸受体实现的。
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