【摘 要】
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[目的]胃癌是最常见的消化道恶性肿瘤,最近几年发病率逐年升高。超过半数患者初次就诊时疾病已进展至中晚期,即使在通过手术根治+辅助性放化疗,治疗效果仍不理想。胃癌转移是
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[目的]胃癌是最常见的消化道恶性肿瘤,最近几年发病率逐年升高。超过半数患者初次就诊时疾病已进展至中晚期,即使在通过手术根治+辅助性放化疗,治疗效果仍不理想。胃癌转移是肿瘤最重要的恶性特征,也是导致肿瘤患者死亡的最主要原因。肿瘤的转移是一个多步骤的过程,在肿瘤转移初期过程中肿瘤细胞发生上皮间质转化(Epithelial-Mesenchymal Transition,EMT)。目前,研究发现,转化生长因子与Wnt/β-catenin信号通路在肿瘤EMT进程中发挥着重要作用。我们的目的是探讨胃癌转移过程中发生EMT后的表型改变以及Wnt信号通路在其中的作用机制,为胃癌转移提供新的理论依据,为胃癌转移的靶向治疗提供实验依据。[方法]将人胃癌细胞株MKN28的细胞接种于培养基中,待细胞长至对数期80%汇合度时,进行传代。随后加入不同浓度TGF-β 1(5/10/20/50ng/ml),做72h诱导处理后,通过CCK8、细胞周期试验、侵袭实验及在倒置显微镜下实时观察细胞表型变化并与亲代MKN28细胞株作对比。并且通过Western Blot方法检测MET标志物β-catenin,以及Wnt/β-catenin信号通路相关基因Wnt3a、β-catenin、CyclinD1的表达与原肿瘤细胞做对比。[结果]实验发现不同浓度TGFβ 1在体外能够诱导胃癌细胞发生上皮间质转化。使得胃癌细胞出现细胞形态改变、细胞之间黏附力减弱、细胞活力增加,增殖、侵袭能力增强。与此同时还可激活胃癌细胞中的Wnt3a信号通路,上调Wnt3a、β-catenin、CyclinD1的表达;但实验结果与TGFβ1的浓度未出现相关性,在该试验中存在最佳诱导浓度为1Ong/ml。[结论]1.胃癌细胞在不同浓度TGFβ1的诱导下可发生EMT转化,其细胞形态改变、细胞之间黏附力减弱、细胞活力增加,增殖、侵袭能力增强。2.TGFβ 1可以有效激活Wnt3a信号通路促进胃癌细胞进一步发生EMT。3.TGFβ 1在诱导过程中胃癌细胞表达产物的变化与其浓度未出现相关性。
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