南板蓝(马蓝)叶中靛玉红的提取工艺研究

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本文以南板蓝叶为原料,对南板蓝叶中靛玉红的提取工艺进行了研究,探索出了一条生产周期短、提取率高、成本低、环境污染小、适宜工业化生产的南板蓝叶靛玉红提取工艺方法,建立起了准确度高、灵敏度和稳定性好的靛玉红高效液相色谱分析方法。  本研究确定了南板蓝叶提取物中靛玉红的高效液相色谱检测方法:以甲醇-氯仿混合溶液为溶剂,用超声波辅助溶解样品作为分析前处理方法,采用C18柱(250mm×4.6mm,5um)为色谱柱,甲醇-水(75:25)为流动相,于1.0mL·min-1的流速,30℃的柱温,290nm的检测波长的条件下对靛玉红进行测定。该条件下测定在10.5~126.0ug·mL-1浓度范围内线性关系良好,平均加样回收率为102.8%,相对标准偏差RSD为1.48%。研究了浸渍法、渗漉法、回流法、超声波辅助提取法、微波辅助提取法、超临界CO2萃取法以及酶法对南板蓝叶中靛玉红的提取工艺,通过单因素及正交试验分析法对提取工艺进行优化,确定了浸渍法最佳提取条件为浸提60h,浸提2次,料液比为1∶12,乙醇浓度为70%乙醇水溶液,经验证在该条件下,靛玉红提取的 Z%值(样品含量和提取率的算术平均值)为2.98;渗漉法最佳提取条件为60%乙醇溶液、溶剂用量为药材量的30倍、浸泡8h、渗漉速度为4mL·min-1·kg-1,经验证在该条件下,靛玉红提取的Z%值为4.14;回流法最佳提取条件为提取4次,提取时间9h,料液比为1∶6,提取温度为65℃,经验证在该条件下,靛玉红提取的Z%值为3.98;超声波辅助提取的最佳提取条件为超声频率40kHz,提取2次,提取60min,料液比为1∶4,提取温度为65℃,经验证在该条件下,靛玉红提取的Z%值为7.12;微波辅助提取的最佳提取条件为微波处理2.0min,料液比为1∶6,提取4h,经验证在该条件下,靛玉红提取的Z%值为4.78;超临界CO2萃取法提取的最佳工艺条件为萃取温度为50℃,萃取压力为35MPa,分离温度为30℃,分离压力为10MPa, CO2流量为7L·h-1,经验证在该条件下,靛玉红提取的Z%值为9.99;酶法辅助提取的最佳工艺条件为料液比为1∶8(w/v)、酶用量为25U·g-1药材的量、酶解pH值4.8、酶解温度50℃、酶解6h,经验证在该条件下,靛玉红提取的Z%值为7.02。以操作时间、原材料成本以及提取的 Z%值为指标,对比研究了七种提取方法,得出超临界CO2萃取法、超声波法为实验室提取南板蓝叶中靛玉红的理想方法,而酶法为工业化生产中提取南板蓝叶中靛玉红较理想方法。
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