目的掌握HaCaT细胞培养的技术,了解细胞的生长特性;研究重组人碱性成纤维细胞生长因子(rh-bFGF)在不同浓度下对HaCaT细胞的增殖影响,以及rh-bFGF对HaCaT细胞有无异常分化的作用,并以此为临床准确定量应用rh-bFGF修复创面愈合提供理论依据。方法利用HaCaT细胞体外培养,用不同浓度的rh-bFGF干预细胞,四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)检测细胞的活性,选择最适浓度rh-bFGF干预的HaCaT细胞,用流式细胞仪检测细胞的DNA倍体情况。结果①HaCaT细胞生长过程的观察:HaCaT细胞传代后24h基本贴壁,未贴壁的细胞在换液过程中被清除,约4-5天长满瓶底的80%,继续传代。该细胞分布较均匀,呈长条形或梭形。②不同浓度rh-bFGF对HaCaT细胞增殖的影响:rh-bFGF的浓度为0-100ng/ml时,不同浓度各组相比,P＜0.05,具有统计学差异,吸光度值分别为0.137±0.012,0.216±0.022,0.318±0.019,0.362±0.011,0.452±0.017,0.510±0.012,提示此浓度下对HaCaT细胞有增殖作用,在100ng/ml下增殖最强;在500ng/ml时,与Ong/ml组相比,P＞0.05,无统计学差异,吸光度值为0.140±0.057,提示无明显增殖作用。③培养48h时流式细胞仪对rh-bFGF最适浓度下细胞倍体含量的测定:在100ng/ml下无细胞倍体异常的情况。结论rh-bFGF的浓度为1-100ng/ml时,对HaCaT细胞有明显的增殖作用,其最佳浓度是100ng/ml。临床使用中应注意有效浓度的重要性,可以更快的促进创面的愈合,减少瘢痕的形成,降低再手术植皮率,提高患者生活质量,缩短住院时间,减少医疗费用。