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目的:探讨沉默紫外线抵抗相关基因(UVRAG)对人白血病K562/ADM细胞自噬及耐药性的影响,初步揭示UVRAG参与白血病K562/ADM细胞多药耐药(MDR)形成的可能机制。方法:1.体外培养K562细胞及K562/ADM细胞,通过Western Blotting检测UVRAG蛋白表达,筛选出表达高者为实验RNA干扰细胞株;2.针对UVRAG基因设计合成特异性的UVRAGsi RNA及与任何基因无同源性的阴性对照Scrambled si RNA,在LipofectamineTM2000介导下转染K562/ADM细胞,通过Western Blotting检测UVRAG蛋白表达,观测UVRAGsi RNA沉默UVRAG基因效果;3.CCK-8法检测阿霉素对K562组、K562/ADM组、NC-K562/ADM组、si-UVRAG-K562/ADM组细胞存活率的影响及半数抑制浓度(IC50)变化;4.继而采用MDC染色荧光显微镜观察K562组、K562/ADM组、si-UVRAG-K562/ADM组细胞自噬体;采用Western Blotting检测K562组、K562/ADM组、NC-K562/ADM组、si-UVRAG-K562/ADM组细胞自噬相关蛋白Beclin-1、耐药蛋白P-gp表达及自噬底物蛋白P62降解情况。结果:1.K562/ADM细胞中UVRAG蛋白表达较K562细胞中高,二者差异具有显著性(P<0.05);UVRAGsi RNA转染K562/ADM细胞可使UVRAG蛋白表达水平明显受抑,证实了UVRAGsi RNA能高效地沉默K562/ADM细胞UVRAG基因表达;2.与NC-K562/ADM组、K562/ADM组及K562组相比,si-UVRAG-K562/ADM组细胞对阿霉素的耐药性显著下降,其IC50值亦明显减小;3.MDC染色荧光显微镜观察显示,K562/ADM组细胞胞浆中的自噬体明显多于K562组,si-UVRAG-K562/ADM组细胞胞浆中的自噬泡却明显少于K562/ADM组;进一步发现K562/ADM细胞中Beclin-1、P-gp表达及P62降解明显高于K562细胞,抑制UVRAG表达后,K562/ADM细胞自噬相关蛋白Beclin-1及耐药蛋白P-gp表达明显降低,而自噬底物蛋白P62降解亦显著减少(P均<0.05)。结论:1.UVRAG蛋白在K562/ADM细胞中高表达,与白血病K562/ADM细胞MDR密切相关;2.UVRAGsi RNA下调UVRAG表达可降低K562/ADM细胞耐药性,其机制可能与降低自噬水平及下调P-gp表达有关。