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猫爪草Radix Ranunculi Ternati系毛茛科Ranunculaceae毛茛属Ranunculus植物小毛茛Ranunculus ternatus Thunb，的干燥块根，是《中国药典》唯一收载的毛茛属植物，现代药理和临床研究表明猫爪草及其制剂对肺结核、淋巴结核、和多种癌症及淋巴瘤有疗效，但目前猫爪草的有效成分尚不明确。本论文对猫爪草中的两类化学成分——多糖和有机酸进行了初步的药学研究。主要内容有：一、文献综述论文就猫爪草的植物形态、化学成分、药理作用及临床应用等研究方面进行了综述。现有文献报道了有关猫爪草的药理研究主要在抗结核菌、抗肿瘤、抗白血病细胞及抗急性炎症等方面；有关化学成分的研究主要涉及挥发油、内酯类、甾醇类成分、不饱和脂肪酸、无机元素和多糖等，但有效成分尚不明确。论文同时对猫爪草同属的一些民间草药的研究状况进行了综述，以期为本药材的研究提供多方面的信息。二、猫爪草多糖的药学试验论文首次对中药材猫爪草中的多糖体系进行了较系统的药学研究，采用水提醇沉及阳离子交换树脂脱蛋白的方法提取了猫爪草粗多糖，并对其进行了体内外初步的药效试验及多糖结构的初步研究；同时首次经系统研究建立了药材中总糖、多糖含量的测定方法。1．药效试验：进行了免疫调节试验、细胞毒试验和结核杆菌药敏试验。粗多糖免疫调节试验结果表明猫爪草粗多糖能促进小鼠网状内皮系统的吞噬功能，提高非特异性免疫功能，具有抑制由DNCB引起的迟发性超敏反应作用，提高特异性细胞免疫功能，并能明显升高免疫低下小鼠的白细胞水平；而MTT法细胞毒试验和体外结核杆菌药敏试验结果分别表明：猫爪草多糖对体外培养肿瘤细胞的增殖及对结核分枝杆菌的抑制作用均不显著。2．结构研究：粗多糖经DEAE-纤维素柱分离，冷冻干燥后得到两个粉末状多糖(MZCP-Ⅰ和MZCP-Ⅱ)。高效凝胶色谱显示MZCP-Ⅰ和MZCP-Ⅱ呈单一色谱峰，以葡聚糖为对照品，测定得MZCP-Ⅰ和MZCP-Ⅱ的重均分子量(Mw)分别为5.82×10~4和4.7×10~4；MZCP-Ⅰ水解前后、MZCP-Ⅱ水解前与茚三酮试剂反应均呈阴性，而MZCP-Ⅱ水解后与茚三酮试剂反应则呈阳性，UV图谱显示260nm和280nm间有微弱的吸收：经蒽酮-硫酸法测定，MZCP-Ⅰ和MZCP-Ⅱ的总糖含量分别为96.02％、80.33％(以无水葡萄糖计)；Lowry法测定MZCP-Ⅰ和MZCP-Ⅱ的蛋白质含量分别为1.41％、17.82％，表明MZCP-Ⅰ和MZCP-Ⅱ均为糖蛋白复合物。通过薄层色谱法和HPLC法对MZCP-Ⅰ和MZCP-Ⅱ水解液的组成分析，MZCP-Ⅰ主要由鼠李糖、木糖、阿拉伯糖和葡萄糖四种单糖组成，MZCP-Ⅱ主要由鼠李糖和葡萄糖组成；KBr压片法红外光谱分析结果显示MZCP-Ⅰ和MZCP-Ⅱ均为β构型。3．药材中总糖、多糖的含量测定方法：以葡萄糖为观测指标，采用硫酸-蒽酮比色法，建立了药材猫瓜草中总糖、多糖含量的测定方法。方法学考察结果表明，在625nm波长下，对照品在10.58～63.49μg／mL的浓度范围内，吸光度与浓度呈良好的线性关系，r=0.9997，平均加样回收率为99.41％，RSD=2.62％(n=6)，符合含量测定要求。本方法操作简便，重现性好。三、有机酸部位的药学试验论文首次以猫爪草有机酸部位为试验对象，进行了初步的药效试验，并采用气相色谱-质谱(GC-MS)联用技术对猫爪草有机酸部位的成分进行了初步的分析。1．药效试验：采用有机溶剂萃取法和阴离子交换法，分别从水提和醇提液及经过大孔树脂AB-8吸附后的穿透液中分离得O1、O2、O3、O4四个有机酸部位，以MTT法体外细胞毒试验和体外结核杆菌药敏试验进行了药理试验，结果表明有机酸部位对肿瘤细胞YAC-1(小鼠淋巴瘤细胞株)，SMMC-7721(人肝癌细胞株)，A-549(人肺癌细胞株)，BGC-823(人低分化胃腺癌细胞株)均有不同程度的抑制作用，同时体外结核杆菌药敏试验结果显示，有机酸部位有显著抑制结核杆菌活性的作用，且有一定的量效关系，有机酸部位是中药材猫爪草抗肿瘤、抗结核的有效部位。2．GC-MS分析：各有机酸部位经10％硫酸-甲醇甲酯化，通过气相色谱-质谱(GC-MS)联用技术分析，表明猫爪草中含多种有机酸成分。经NIST2005标准谱库检索，共检索出有机酸有45个，其中二元酸有16个，三元酸有2个，辛二酸、柠檬酸等有机酸为本论文首次检出。