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目前食源性致病菌检测领域存在的主要问题是不能实现致病菌的快速检测和活菌与死菌的区分。因此,对食源性致病细菌快速,灵敏,低成本的检测方法的研究对保障食品安全和人类健康具有重要意义。表面增强拉曼散射光谱(Surface-enhanced Raman scattering,SERS)技术能够获得完整的微生物指纹图谱,基于SERS的致病菌标记检测方法具有高灵敏度、高选择性、反应时间快、样品制备简便等优点。本研究构建了以滤纸和玻片为固相基质的两种SERS基底,分别对五种食源性致病菌进行了鉴定以及基于适配体的金黄色葡萄球菌的特异性定量检测。主要研究工作包括:首先,构建了一种基于Au@Ag NPs/滤纸基底对五种食源性致病菌(鼠伤寒沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、大肠埃希氏菌、福氏志贺菌、单核细胞增生李斯特氏菌)检测的方法,用于不同菌种的鉴定和区分。通过滤纸良好的吸水性将细菌固定在基底上,增加细菌同基底的接触从而增强细菌SERS信号。结果显示五种细菌SERS光谱主要峰的位置接近,但振动峰的相对强度显著不同,且不同菌种具有独特的拉曼峰。将主成分分析(Principal components analysis,PCA)方法与细菌SERS光谱结合,可以有效地对五种细菌进行分类和鉴定。同时,利用该方法对金黄色葡萄球菌和鼠伤寒沙门氏菌进行定量检测,最低检测浓度均为10~5 cfu/m L。其次,构建了一种基于适配体功能化Au@Ag NPs/玻片基底“夹心式”检测金黄色葡萄球菌的方法,以实现对细菌的特异性定量检测。利用适配体与靶标菌的特异性结合,构建“捕获基底-靶标-信号分子探针”的夹心结构,并将Au@Ag NPs溶胶滴加于捕获细菌的基底上,进一步覆盖细菌表面,构建更多热点,提高检测灵敏度,实现对金黄色葡萄球菌的检测。在最优实验条件下,ROX SERS强度与金黄色葡萄球菌菌落数的对数值在10~2 cfu/m L～10~7 cfu/m L浓度范围内呈现良好的线性关系(y=422.181x+125.389,R~2=0.9926),检测限为34 cfu/m L。特异性实验结果表明该检测方法特异性显著,牛奶样品的加标回收实验结果与平板计数法检测的结果相近,加标回收率为90.73%～102.55%,表明该方法准确可靠。最后,构建一种基于适配体免固定化Au@Ag NPs/玻片基底检测金黄色葡萄球菌的方法,该方法免去了细菌的固定,提高了检测的便捷性与效率。通过静电相互作用与ROX-适配体结合的基底具有一定的SERS信号,然后基于适配体与靶标菌的特异性结合,ROX-适配体从基底表面脱落,导致基底信号强度降低,从而实现金黄色葡萄球菌的检测。在最优实验条件下,ROX的相对SERS强度与金黄色葡萄球菌菌落数的对数值在10~2 cfu/m L～10~7 cfu/mL浓度范围内呈现良好的线性关系(y=795.527x-401.229,R~2=0.9926),检测限为31 cfu/mL。特异性实验结果表明该检测方法特异性显著,牛奶样品的加标回收实验结果与平板计数法检测的结果相近,加标回收率90.60%～107.26%,表明该方法准确可靠。