亚低温对大鼠脑出血后血肿体积及脑水肿影响的研究

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全身亚低温对脑缺血损伤具有保护作用,局部亚低温比全身亚低温更为安全,本实验将研究局部亚低温对实验性脑出血不同时间点脑损伤的作用。  购买230只雄性Wistar大鼠,利用胶原酶Ⅶ制造大鼠脑出血模型。局部亚低温组利用贴敷式局部亚低温治疗仪对大鼠出血侧脑半球进行局部降温,常温组大鼠体温保持在正常范围。大鼠脑出血后1小时,6小时和12小时开始局部亚低温治疗,并比较各局部亚低温治疗组之间及局部亚低温组和常温组之间大鼠脑出血后血肿量和行为学的变化。大鼠脑出血1小时后开始持续4小时的局部亚低温治疗,与常温治疗组一起于出血后第一天和第三天处死。利用干湿重法评价脑水肿程度;利用依文思蓝法评价血脑屏障通透性;利用western blot、实时定量PCR评价紧密连接蛋白(claudin-5,occludin)的蛋白和mRNA水平变化。利用免疫组化检测炎症因子(IL-1β,TNFa)表达的改变。使用方差分析对出血量、行为学评分、脑水肿、血脑屏障通透性、炎症因子的阳性细胞数、紧密连接蛋白的mRNA和蛋白水平等指标进行比较(p<0.05为有差异,p<0.01为有显著差异,p<0.001为有极显著差异)。  早期局部亚低温(脑出血后1小时开始)治疗实验性脑出血后血肿量和晚期亚低温组(脑出血后6小时或12小时开始)及常温组相比有减轻的趋势,但无统计学差异(p>0.05)。NSS行为学评分时早期局部亚低温在脑出血后第三天明显减轻了行为损伤(p=0.014),在其余时间点和晚期亚低温组及常温组相比无统计学差异(p>0.05)。与常温组相比,早期局部亚低温治疗组在出血后第1天和第3天均能明显减轻出血侧脑组织的水肿程度,减少透过血脑屏障的依文思蓝染料的含量和血肿周围表达炎症因子的阳性细胞数,增加紧密连接蛋白mRNA和蛋白的表达水平(p<0.05)。  在大鼠脑出血模型中,早期局部亚低温并未加重出血和行为损伤。此外局部亚低温对于减轻脑水肿、保护血脑屏障的完整性是一种有效的治疗方法,它可以通过抑制炎症因子、增加紧密连接蛋白的表达来发挥保护作用。
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