苯并咪唑类分子探针在液相色谱—质谱中的应用

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高效液相色谱(High Performance Liquid Chromatography)因其强大的分离分析能力而成为分析实验室常用的仪器,已被广泛运用到许多科学研究领域如化学,生物化学,毒物学,临床医学,工业、农业、商检和法检、神经生物学、食品卫生等。高效液相色谱法是目前为止已经掌握的对复杂化合物分离的最有效手段之一。由于样品中待测组分自身的结构性质及低含量的限制,并非所有的化合物都可以直接用于液相色谱分析。目前,荧光检测被认为是最灵敏的检测手段之一,利用荧光标记技术使本身不发荧光的化合物(如脂肪胺、芳香胺、酚、脂肪醛等)转化成发射荧光的衍生物,从而实现高灵敏的荧光检测。本文重点研究三种新型荧光衍生试剂的合成和结构表征,并且考察标记试剂的光谱性质。通过对衍生、色谱分离条件的优化,建立了高效、灵敏的高效液相色谱-质谱分析方法,并将所建立方法用于实际样品的测定中。具体工作内容如下:第一章:概述色谱法的创立和发展历史以及高效液相色谱的基础知识及其发展过程;介绍荧光原理和化学衍生化法;总结目前广泛使用的荧光标记试剂,综述标记胺类、酚类、脂肪醛的荧光试剂。第二章:三种新型荧光试剂:1-(1-氢-咪唑)-2-(2-苯基-1-氢-菲[9,10-d]咪唑-乙酮(IPPIE)、2-(2-苯基-1-氢-菲[9,10-d]咪唑-乙酰肼(PPID)、2-(2-(10-蒽基)-苯并咪唑)-乙酰肼(ABID)的设计合成、结构表征、光谱性质的研究。第三章:新型荧光试剂IPPIE用于脂肪胺高效液相色谱-质谱的分析,通过对衍生化条件以及色谱分离条件的优化,建立了脂肪胺的柱前衍生化高效液相色谱荧光检测法,并把该方法运用到土壤样品的测定中,实现样品中脂肪胺的高灵敏检测。结果表明IPPIE在无催化剂条件下实现对脂肪胺的高选择性衍生,衍生反应条件温和,衍生效率高,线性范围宽,重现性好,操作简单,灵敏度高。第四章:荧光试剂IPPIE用于芳香胺和酚类化合物的高效液相色谱-质谱的分析,通过对衍生化条件以及色谱分离条件的优化,建立了芳香胺和酚类化合物的柱前衍生化高效液相色谱荧光检测法,并将建立的两种方法分别用于布料中芳香胺的检测和污水中酚类化合物的检测,实验结果表明所建立的方法具有很大可行性。第五章:新型荧光试剂ABID用于短链脂肪醛的高效液相色谱-质谱分析。通过对衍生条件和色谱条件的优化,建立了脂肪醛的柱前衍生高效液相色谱荧光检测法,实验结果表明,该方法衍生反应条件温和,衍生产率高,重现性好,实验操作简单,灵敏度高。并将其运用到白酒样品中脂肪醛的测定,取得满意的结果。
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