论文部分内容阅读
本论文将传统微生物检测方法和现代分子生物学检测手段相结合,比较研究了不同精粗比和不同氮源日粮条件下主要纤维降解菌群的变化,并通过瘤胃发酵规律和纤维素酶活的检测来进一步探讨瘤胃微生物对纤维物质的降解机理。试验分两期进行。1.不同精粗比日粮对瘤胃纤维降解菌群和纤维物质降解的影响试验选用9只体况良好、体重50公斤左右的苏尼特绵羊随机分为三组,每组3只。Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组精粗比分别为1:9、3:7和5:5。通过传统检测方法检测不同精粗比日粮对瘤胃真菌、细菌浓度和数量的影响差异不显著(P﹥0.05);密毛虫、双毛虫、头毛虫、总纤毛虫数量变化显著(P<0.05),Ⅱ组数量最高;纤维降解菌的数量随精料增加呈下降趋势,且组间差异显著(P﹤0.05),定量杂交方法和定量PCR方法也得到相同结果。F.succinogenes通过两种分子生物学方法检测受日粮影响均不显著,但在三株纤维分解菌中占绝对优势;R.albus和R.flavefaciens的定量PCR方法检测结果为Ⅱ组显著高于Ⅲ组(P﹤0.05)。随精料增加瘤胃pH呈下降趋势,组间差异显著(P﹤0.01);氨氮和总挥发性脂肪酸浓度与之相反,Ⅲ组显著高于Ⅰ组和Ⅱ组(P﹤0.01);乙酸摩尔浓度百分比随精料增加显著降低(P﹤0.05),丙酸和丁酸摩尔浓度显著升高(P﹤0.05)。不同精粗比日粮对固相食靡流通速率、纤维物质的动态降解率影响不显著(p﹥0.05)。不同处理组之间各消化道部位的流通速率、消化率差异均不显著(p﹥0.05),但纤维类物质在瘤胃的消化率表现为Ⅰ组高于Ⅱ组和Ⅲ组,整个消化道的比较结果3:7和1:9日粮高于5:5日粮。各组之间液相流通速率差异显著(p﹤0.05),即3:7组数值较高,对瘤胃体积的影响不显著(p﹥0.05)。日粮精粗比变化对绵羊瘤胃液相纤维素酶影响不显著(p﹥0.05);而对固相酶活有一定影响,结果为Ⅲ组果胶酶活显著高于Ⅰ组和Ⅱ组(p﹤0.05),Ⅰ组滤纸酶活显著高于Ⅲ组(p﹤0.05),固相酶活普遍比液相酶活高。2.不同氮源日粮对纤维降解菌群及纤维物质降解的影响试验选用12只体况良好、体重50公斤左右的苏尼特绵羊随机分为四组,每组3只。Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组、Ⅳ组分别饲喂氮源为葵粕+玉米蛋白粉、鱼粉、棉粕、豆粕的日粮。传统方法检测结果表明Ⅲ组瘤胃真菌数量显著高于Ⅱ组和Ⅳ组(P﹤0.05);荧光实时定量PCR结果与之相一致。而瘤胃细菌组间差异不显著(P﹥0.05);氮源对均毛虫、密毛虫、双毛虫、头毛虫影响显著(P﹤0.05);对内毛虫、总纤毛虫数量影响极显著(P﹤0.01),总体趋势为Ⅳ组纤毛虫多Ⅲ组少;Ⅲ组纤维分解菌显著高于Ⅱ组和Ⅰ组(P﹤0.05)。定量PCR法检测表明Ⅲ组F. succinogenes显著高于Ⅰ组(P﹤0.05);R.albus和R. flavefaciens的数量受氮源影响不显著(P﹥0.05)。瘤胃pH受N源影响显著,其中Ⅲ组显著高于Ⅳ组(P﹤0.05);对瘤胃NH3-N浓度、总VFA和丁酸的浓度影响不显著(P﹥0.05),乙酸摩尔浓度百分比结果为Ⅱ组显著低于其它三组(P﹤0.05),丙酸摩尔浓度百分比结果与之相反(P﹤0.01)。不同N源日粮对固相食靡流通速率、液相食靡流通速率、瘤胃体积、纤维物质的动态降解率影响均不显著(p﹥0.05)。瘤胃液相木聚糖酶活受N源影响显著(p﹤0.05),其中Ⅱ组显著高于Ⅲ组和Ⅳ组(p﹤0.01),Ⅲ组显著高于Ⅳ组(p﹤0.05)。瘤胃固相食靡果胶酶为Ⅲ组显著高于Ⅰ组(p﹤0.05);糖苷酶为Ⅰ组显著高于Ⅱ组(p﹤0.05),而与Ⅲ组、Ⅳ组差异不显著(p﹥0.05);木聚糖酶的变化结果是Ⅰ组、Ⅲ组、Ⅳ组均显著高于Ⅱ组(p﹤0.01)。