第一部分目的通过研究着床相关基因腺病毒E4启动子结合蛋白—4（E4BP4）在子宫内膜异位症（内异症,EM）患者在位子宫内膜中的表达变化及分布,探讨内异症关联性不孕的分子机制。方法选取EM患者与非EM患者各13例,分别取其增生期（proliferativeendometrium,PE）和分泌期子宫内膜（secretory endometrium,SE）。采用RT-PCR、real-time quantitative PCR和Western blowing从mRNA和蛋白水平对E4BP4的表达变化进行分析。免疫组化检测E4BP4蛋白在两组内膜中的分布。结果分泌期及增生期EM组E4BP4 mRNA及蛋白水平显著下调,与对照组相比,差异具有统计学意义（P＜0.05）;E4BP4蛋白主要分布于子宫内膜腺上皮及基质的胞浆与胞核中,在分泌期,内异症组E4BP4蛋白含量水平与对照组相比明显下降,而增生期两者差异不明显。结论E4BP4在子宫内膜异位症患者在位子宫内膜中的表达下调,提示E4BP4可能参与介导EM对胚胎着床的影响。第二部分目的探讨着床相关基因儿茶酚邻位甲基转移酶（COMT）在小鼠动情周期及EM患者在位子宫内膜中的表达调控规律,为其参与调节生殖过程的作用机制提供新的证据。方法1.采用RT-PCR,real-time quantitative PCR和Western blotting检测成年小鼠动情周期不同时相以及孕第7天鼠的子宫、卵巢中COMT表达有无变化。2.性成熟前小鼠分别用E₂（苯甲酸雌二醇）、P₄（孕酮）、E₂+Tam（苯甲酸雌二醇+他莫昔芬）、P₄+R（孕酮+米非司酮）处理,检测其子宫和卵巢中COMT mRNA水平有无变化。3.采用Western blotting及RT-PCR检测COMT在EM患者及对照组在位子宫内膜中的表达变化。结果1.成年小鼠子宫与卵巢中COMT mRNA和蛋白水平在动情期较高,与其它时相相比,差异有统计学意义（P＜0.05）;孕第7天小鼠子宫的COMT mRNA水平有下降趋势,与未孕小鼠相比,差异具有统计学意义（P＜0.05）。2.性成熟前小鼠子宫中COMT mRNA水平各激素处理组间均无差异（P＞0.05）,而在性成熟前小鼠各激素处理组的卵巢中却显示苯甲酸雌二醇（E₂）组COMT mRNA偏低,E₂+Tam（他莫昔芬）组中COMT mRNA较高,两组比较差异具有统计学意义（P＜0.05）。3.内异症患者分泌期、增生期子宫内膜中COMT mRNA和蛋白水平与对照组相比,差异均不具统计学意义（P＞0.05）。结论1.小鼠COMT mRNA水平随动情周期变化,而且与妊娠有关;雌激素对COMT的生物合成具有负调节作用,而且这种作用可能是通过雌激素受体依赖性方式进行。2.COMT与内异症胚胎种植微环境的改变之间无明显相关性。第三部分目的应用基因芯片技术比较EM患者与对照组分泌期子宫内膜基因表达谱的差异,探讨内异症关联性不孕的分子机制。方法应用基因芯片检测EM组（n=8）和非EM组（n=9）分泌期子宫内膜的基因表达谱,筛选表达水平出现差异变化的基因,结合信息学工具和文献检索,分析筛出基因发生表达变化的生理与病理学意义。结果经过基因芯片检测,在EM组分泌期子宫内膜的基因表达谱中,有186个基因表达上调大于2倍,而236个基因表达下调小于0.5倍。通过KEGG和Genemap数据库的生物学过程分析,说明可能通过影响细胞信号转导,调节炎症因子及细胞粘附与分化等生物学过程,导致胚胎着床微环境发生异常改变。结论EM患者子宫内膜基因表达谱的变化反映了子宫内膜异位症可能对胚胎着床的影响,为进一步的分子机制研究提供了基因靶点。