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本文研究了低氧对体外培养的大鼠心肌细胞Na+通道基因SCN5A表达的影响以及其与低氧条件下心肌细胞丙二醛(Malondialhyde,MDA)水平和超氧化物歧化酶(Superoxidedismutase,SOD)活性改变的关系。
方法:将培养的大鼠心肌细胞分为对照(5%CO2+95%空气)组、低氧(5%CO2+2%O2+93%N2)1h、6h、12h和24h组,分别检测培养液O2分压和CO2分压。用逆转录PCR(RT-PCR)、免疫细胞化学和WesternBlot蛋白印迹技术检测心肌细胞SCN5AmRNA和蛋白质的表达,检测心肌细胞MDA含量和SOD活性。
结果:与对照组O2分压(180.0±6.40)mmHg相比,各低氧组O2分压降至(86.0±6.96)mmHg(P>0.05),CO2分压在对照组与各低氧组都维持在(68.0±5.72)mmHg(P>0.05);SCN5AmRNA相对内参照表达:低氧1h组(0.858±0.095)和低氧6h组(1.147±0.119)显著高于对照组(0.769±0.077)(P<0.001);而低氧12h组(0.575±0.077)和低氧24h组(0.437±0.065)显著低于对照组(P<0.001);低氧1h和6h组SCN5A蛋白质表达水平显著高于对照组,而低氧12h和24h组SCN5A基因蛋白质表达水平显著低于对照组。与对照组相比,各低氧组心肌细胞MDA含量随低氧时间延长显著升高,而SOD活性随低氧时间延长显著降低(P<0.05)。
结论:培养心肌细胞Na+通道基因SCN5A在低氧1h和6hmRNA和蛋白质表达均上调,而在低氧12h和24hmRNA和蛋白质表达均下调,且这种表达的改变与细胞脂质过氧化和抗氧化能力有相关性。