阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease，AD）是以认知障碍为特征的神经退行性疾病，其典型的病理变化包括β-淀粉样蛋白（Aβ）沉积形成老年斑（SP）、神经纤维缠结（NFT）、基底前脑胆碱能功能障碍、皮层与海马广泛的神经元丢失和突触形态的改变。其中Aβ的生成、代谢及其毒性作用在AD的病理机制中是中心环节。Aβ可通过扰乱Ca²⁺稳态、引发氧化应激、兴奋性毒性、线粒体功能障碍、能量耗竭、细胞凋亡、神经炎性反应等机制导致神经元丢失。因此拮抗Aβ的毒性作用是AD治疗药物的重要靶点。 HSH-971为具有特定Aβ结合位点的低分子海洋硫酸寡糖化合物，可阻止Aβ的纤维化聚集。本实验以Aβ损伤模型为主要研究对象，从整体水平、细胞水平和分子水平系统探讨了HSH-971的抗老年痴呆作用及其机理；同时还观察了D-半乳糖致脑老化模型及HSH-971干预保护作用，从多层次探讨HSH-971的神经保护机制，为新药开发和临床用药提供理论依据。 第一部分 HSH-971对Aβ致细胞及小鼠脑损伤的干预及机理 1．刚果红结合实验和电镜均观察到，1、10、100μg/ml HSH-971经体外24h和48h与Aβ_1-40孵育可显著抑制其纤丝形成和聚集；硫黄素T结合实验亦显示HSH-971可显著抑制Aβ_25-35与硫黄素T的结合，在5μg/ml以上浓度其结合率被抑制在20％以下。 2．侧脑室注射Aβ_25-35建立脑损伤动物模型，MWM试验检测空间和方位学习记忆能力，结果显示HSH-971（150、450mg/kg）可明显改善Aβ_25-35所致的小鼠空间学习记忆障碍，其寻找实台潜伏期比模型组明显缩短。 3．MWM试验结束后，动物断头处死分离皮层、海马，采用比色法测定酶活力和MDA含量。同位素法测ChAT活性，受体饱和实验测定mAchR Kd值和Bmax值。结果表明HSH-971可明显改善Aβ_25-35所致的小鼠脑内氧化应激状态，维持能量代谢的稳定，改善皮层和海马胆碱能系统功能。