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目的:研究中国弯颈霉菌丝提取物（TSE）对60Coγ电离辐照小鼠造血系统和免疫系统损伤的保护作用,探讨TSE对γ辐照损伤的保护机制,为寻找潜在的新型辐射防护剂提供基础研究。第一章TSE的标志性成分测定方法:利用HPLC法检测TSE中尿苷、鸟苷、腺苷含量,流动相为甲醇-水,洗脱时间为40 min,检测波长为260 nm,柱温30℃,流速1.0 m L/min,进样量20μL。考察DNS法中显色剂用量、显色反应时间、2 mol/L盐酸用量、酸水解时间、葡萄糖线性关系的最优条件,计算精密度、稳定性、重复性和加样回收的RSD,并计算多糖含量。结果:经HPLC检测,中国弯颈霉菌丝中鸟苷、尿苷、腺苷含量分别为0.83 mg/g、3.48mg/g、0.96 mg/g（其中腺苷占生药质量百分比为0.096%）。经分析确定最优检测条件是显色剂用量6 m L,显色反应时间10 min,2 mol/L盐酸与TSE体积比1:5,酸水解时间40 min,以标准品体积为1 m L,反应时间10 min时制作葡萄糖标准曲线,在DNS法最优检测条件下,其精密度、稳定性和重复性均良好,加样回收较高,该法测得中国弯颈霉菌丝发酵液中多糖含量为3.16 mg/m L（占生药质量百分比为8.8%）。第二章TSE的抗γ辐射效应研究方法:（1）用于30 d生存分析实验的60只小鼠随机分6组:正常组（Normal）,辐照模型组（Model）,低剂量组（TSE-90 mg/kg）,中剂量组（TSE-180 mg/kg）,高剂量组（TSE-360mg/kg）,尼尔雌醇组（Nilestriol）。除Normal组外,其他组均以单次8Gy 60Coγ射线全身辐照小鼠,建立辐射损伤模型,辐照后2 h进行连续灌胃给药14 d,每天通过观察小鼠存活状态,监测30 d生存率,并每周称量一次小鼠体重,30 d观察期结束后,分别采集胸腺、脾脏、股骨,计算脏器指数,HE染色检测脏器和骨髓组织病理改变,计算骨髓有核细胞比例。（2）通过30 d生存分析实验发现,高剂量组效果更好,因此又以高剂量组做7 d短期辐照实验,将40只小鼠随机分4组:正常组（Normal）,辐照模型组（Model）,高剂量给药组（TSE）,尼尔雌醇组（Nilestriol）。除Normal组外,其他组均以单次8Gy 60Coγ射线全身辐照小鼠,建立辐射损伤模型,辐照后2 h进行连续灌胃给药7 d,7 d观察期结束后,分别采集胸腺、脾脏、股骨,计算脏器指数,HE染色检测脏器和骨髓组织病理改变,计算骨髓有核细胞比例。结果:（1）30 d小鼠存活率结果显示:用TSE处理各组较Model组存活率均升高,且TSE-360 mg/kg组存活率优于Nilestriol组。（2）30 d小鼠体重结果显示:Model组体重在照后一周达到最低,用TSE处理各组体重则是两周后降到最低。（3）7 d和30 d小鼠脏器指数结果显示:TSE组7 d胸腺指数较Model组高,脾指数无差异;TSE组30 d胸腺和脾指数均较Model组高。（4）7 d和30 d小鼠胸腺、脾脏、骨髓HE结果表明:Model组整体胸腺组织萎缩,TSE组胸腺组织形态完整,皮质和髓质清晰可见;Model组脾萎缩,脾小结轮廓模糊,TSE组脾组织红髓和白髓清晰呈现,有新长出脾结节;Model组骨髓有核细胞数减少,TSE组骨髓有核细胞聚集性出现。（5）7 d和30 d小鼠骨髓有核细胞比例显示:用TSE处理后小鼠7 d急性期和30 d恢复期骨髓有核细胞比例均升高,且高于Nilestriol组。第三章TSE的抗γ辐射机制研究方法:（1）流式细胞术检测辐照后（7 d）小鼠脾细胞凋亡情况。（2）Western Blot检测辐照后（7 d）小鼠胸腺和脾组织中Cyclin D1、Bax、Bcl-XL、Bcl-2蛋白表达情况。结果:（1）小鼠7 d脾细胞流式细胞术结果显示:TSE组较Model组脾坏死细胞率、凋亡细胞率降低,活细胞率升高。（2）小鼠7 d胸腺和脾组织Western Blot结果显示:与Normal组相比,Model组胸腺和脾组织中Cyclin D1、Bcl-XL、Bcl-2蛋白表达均下降,Bax蛋白表达升高,但无统计学差异;与Model组相比,TSE组胸腺组织中Cyclin D1、Bcl-XL、Bcl-2蛋白表达均升高,Bax蛋白表达降低。结论:1.HPLC和DNS法最优条件下适合测定三苷和多糖含量,TSE中腺苷含量符合《中国药典》对冬虫夏草规定,可以将3种核苷类物质以及多糖含量作为检测TSE活性的重要物质。2.TSE可提高60Coγ射线照后小鼠存活率,延长存活时间,延缓辐照导致的小鼠体重降低时间,阻碍急性期胸腺指数降低,促进恢复期胸腺指数回升,缓解急性期胸腺组织和脾组织结构损伤,以及促进恢复期胸腺细胞和脾细胞增殖,增加脾结节数,还可有效缓解照后7 d骨髓造血细胞损伤,促进30 d骨髓造血细胞再生。TSE对辐照后小鼠胸腺、脾和骨髓组织具有保护作用,且高剂量组疗效优于阳性药尼尔雌醇。3.TSE升高脾组织中活细胞率,降低脾坏死细胞率、凋亡细胞率,通过上调增殖蛋白CyclinD1、抑凋亡蛋白Bcl-XL、Bcl-2的表达,下调促凋亡蛋白Bax表达,进而抑制照后小鼠胸腺和脾组织凋亡。