黑加仑中四种主要花色苦成分提取纯化工艺的研究

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在本实验中使用绿色环保的低共熔溶剂作为提取溶剂并结合微波对黑加仑飞燕草素3-O-葡萄糖苷、飞燕草素3-O-芸香糖苷、矢车菊素3-O-葡萄糖苷和矢车菊素3-O-芸香糖苷进行绿色高效提取,同时对提取液中黑加仑四种主要花色苷进行大孔吸附树脂结合中压快速色谱的富集和纯化。研究了低共熔溶剂微波辅助提取的方法工艺,并对工艺参数进行了优化,并利用 pH示差法和快速简便的高效液相分析检测方法对花色苷成分进行快速准确的定性及定量检测,为开拓黑加仑资源提供了重要的数据支持。  本研究主要内容包括:⑴建立了非常快速简便的定量检测黑加仑中花色苷含量的pH示差法,并建立了高效液相色谱同时分析检测黑加仑中飞燕草素3-O-葡萄糖苷、飞燕草素3-O-芸香糖苷、矢车菊素3-O-葡萄糖苷和矢车菊素3-O-芸香糖苷四种主要花色苷的方法。⑵对黑加仑中四种主要花色苷的提取的工艺参数进行了Box-Behnken Design(BBD)实验设计工艺优化,确定了最优提取的参数,测得黑加仑花色苷的提取平均得率为2.03 mg/g(n=3),提取率优于使用低共熔溶剂超声提取法以及80%乙醇微波辅助提取法。⑶确定了大孔吸附树脂结合中压快速色谱速快速分离纯化黑加仑中四种主要花色苷的工艺。通过一次大孔吸附树脂的富集,结合中压快速色谱的分离纯化和重结晶后,分别得到飞燕草素3-O-葡萄糖苷、飞燕草素3-O-芸香糖苷、矢车菊素3-O-葡萄糖苷和矢车菊素3-O-芸香糖苷22.31 mg、35.47 mg、11.83 mg和31.36 mg,纯度均在95%以上,最终得率依次为0.32mg/g、0.47 mg/g、0.18 mg/g、0.43 mg/g。该工艺不仅具有简单易行、得到的产品纯度高和易于扩大化生产等特点,同时为大规模生产花色苷类成分提供了重要的理论基础。
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