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目的:在课题组前期研究的基础上,进一步研究miR-711对CD44的调控作用及其与胃癌细胞发生EMT的相关性,初步揭示miR-711对胃癌侵袭转移的调节机制。方法:1)使用TargetScan靶基因预测数据库检索miR-711与CD44 3’UTR的结合位点,mi R-711 mimics与CD44 3’UTR质粒共转染293T细胞,荧光素酶报告基因实验检测荧光素酶活性,验证miR-711对CD44的靶向调控作用。2)通过脂质体转染法将miR-711过表达(miR-711 mimics)、miR-711抑制表达(miR-711 inhibitors)、miRNA空质粒(miRNA-NC)分别转染人胃癌细胞株MGC-803及SGC-7901,以miRNA空质粒转染组作为阴性对照组,以空白转染组作为空白对照组,转染48小时后在荧光显微镜下观察转染效率,Western Blot实验检测各组CD44蛋白的表达量。3)通过脂质体转染将CD44干扰质粒(沉默组)、CD44空质粒转染人胃癌细胞株MGC-803及SGC-7901,以CD44空质粒作为阴性对照组,以空白转染组作为空白对照组,转染48小时后在荧光显微镜下观察转染效率,Western Blot实验检测各组CD44蛋白的表达量及EMT相关分子标志蛋白E-cadherin、Vimentin的表达量。结果:1)生物信息学分析结果显示miR-711与CD44 3’UTR之间存在结合位点;荧光素酶报告基因实验结果显示,与对照组相比,miR-711 mimics与CD44 3’UTR荧光素酶报告质粒共转染细胞后,相对荧光素酶活性减少,差异有统计学意义(p<0.05)。2)人胃癌细胞株MGC-803、SGC-7901瞬时转染miR-711过表达及抑制表达质粒后,Western Blot结果均显示,与miR-711 inhibitors组、阴性对照组及空白对照组相比,miR-711 mimics组CD44蛋白表达量减少,差异有统计学意义(p<0.05);与阴性对照组及空白对照组相比,miR-711inhibitors组CD44蛋白表达量增多,差异有统计学意义(p<0.05);阴性对照组与空白对照组相比,差异无统计学意义(p>0.05)。3)人胃癌细胞株MGC-803、SGC-7901瞬时转染CD44干扰质粒后,Western Blot结果均显示,与阴性组及空白组相比,沉默组CD44蛋白表达量减少,间质标志物Vimentin蛋白表达量减少,上皮标志物E-cadherin蛋白表达量增多,差异有统计学意义(p<0.05),阴性组与空白组相比,差异无统计学意义(p>0.05)。结论:1、CD44为miR-711的靶基因之一;2、miR-711可通过下调CD44的表达抑制人胃癌细胞株MGC-803、SGC-7901发生EMT。