目的：利用海藻酸钠微胶囊免疫隔离及选择性透过的特性,使其包裹神经母细胞瘤株,与骨髓间充质干细胞共培养,研究骨髓间充质干细胞在此特殊的生物微环境下,被诱导、分化为神经细胞的情况。方法：(1)骨髓间充质干细胞的体外培养阶段：4-6周SD雄性大鼠4只,取其双下肢股骨及胫骨骨髓,用10%FBS+L-DMEM冲洗骨髓腔,以全骨髓培养法培养细胞,每3天换液,当细胞达到80%-90%时消化传代,扩传到第五代后使用。(2)神经母细胞瘤细胞的体外培养阶段：将购买的瘤细胞解冻复苏,用10%+1640培养细胞,每2天换液,当细胞达到80%-90%时消化传代,扩传到第五代后使用。(3)共培养阶段：先将传至第五代的神经瘤细胞进行微囊化包裹,作为诱导组。另备同等数量的瘤细胞,搅碎、滤过,取上清作为匀浆组备用。实验分组：①.空囊对照组：将1×104/cm2的骨髓间充质干细胞接种于3×10cm培养皿中,并加入空微囊。②微囊化瘤细胞诱导组：将1×104/cm2的骨髓间充质干细胞接种于3×10cm培养皿中,以1：2,1：3的细胞数目比加入已包裹好瘤细胞的微囊。③匀浆诱导组：将1×104/cm2的骨髓间充质干细胞接种于3×10cm培养皿中,将备好的上清液与神经细胞培养液按1：5,1：10混合,两组分别于3、5、7、9天取出,固定,免疫细胞化学染色。(4)在激光共聚焦显微镜下观察,选取非重叠视野计数阳性细胞数和总细胞数,结果用均数±标准差表示。应用SPSS 11.0软件包进行方差分析和组间比较。结果：除空囊对照组各组细胞均发生了形态学改变,其中1：5组在第一天最明显,1：3组在第三天最明显。免疫荧光染色结果显示,1：2组在第三天Nestin阳性最多。微囊诱导组中均出现神经细胞,并呈逐渐衰亡趋势。匀浆组中同样出现Nestin及TubulinⅢ阳性,但在第五天后分别出现不同程度的肿瘤细胞样改变。结论：本实验所建立的微囊化瘤细胞诱导体系,可以诱导骨髓间充质干细胞向神经前体细胞及神经细胞分化。