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棉花黄萎病是我国以及世界棉花作物的主要病害之一，难以防治。对此现状，尚需探索新的可能的防治方法。Ovarian Tumor protease（OTU蛋白酶）具有去泛素化、降低寄主免疫力、增强病毒侵染性的功能。真菌病毒Verticillium dahliae chrysovirus1（VdCV1）的OTU蛋白可能也具有去泛素化、使真菌免疫力下降、增强病毒侵染性的功能，对利用OTU基因及真菌病毒防治棉花黄萎病菌及其它真菌具有重要意义。本课题开展病毒VdCV1的OTU蛋白的表达、纯化和抗体制备研究，以获得OTU蛋白及其多克隆抗体，为探明病毒VdCV1的OTU蛋白的功能作必要的基础准备。 本课题首先开展了病毒VdCV1的OTU蛋白的原核表达。采用Gateway技术经过BP反应和LR反应，将OTU基因的编码区序列2469 bp克隆至原核表达载体pET42-DEST（含6个组氨酸序列标签）中，得到重组的原核表达质粒pET42-VcR4。转化大肠杆菌BL21，以1mM IPTG37℃诱导4h，产物经SDS-PAGE电泳表明获得了97KD的目的蛋白，并经His标签抗体Western blotting鉴定正确。 然后本课题进行了OTU蛋白的原核表达产物的纯化、复性和多克隆抗体制备。采用亲和层析纯化法与分子筛层析相结合的纯化方法，获得纯化的OTU蛋白；采用透析复性法与层析柱镍螯合复性方法，获得了可溶性OTU蛋白；采用皮下免疫大白兔的方法获得了OTU蛋白的多克隆抗体。以制备的多克隆抗体为一抗与HRP标签的羊抗兔为二抗做Western blotting鉴定，检测到菌株Bl21表达的OTU蛋白存在。 最后本课题开展了植物病毒Foxtail mosaic virus（FoMV）外源蛋白表达载体的构建与表达研究。构建了pCB301-FOMV-VcR4、pCB301-FOMV-GFP表达载体，转化农杆菌并浸润接种本氏烟，经紫外灯检测绿色荧光和SDS-PAGE电泳表明，pCB301-FOMV-VcR4、pCB301-FOMV-GFP表达载体构建成功，GFP蛋白和OTU蛋白在本生烟中都成功地较大量表达。