Wnt/β-catenin信号通路在胚胎发育、肿瘤发生以及干细胞的自我更新中具有重要的作用。蛋白激酶CK1参与Wnt/β-catenin信号通路的调节,并且是一个治疗乳腺癌的有效靶点。最新研究报道,嘌呤衍生物longdaysin能够通过靶向作用蛋白激酶CK1δ,CK1α和ERK2调节细胞的生物钟,是一种新颖的生物钟调节因子。然而,longdaysin的抗肿瘤活性及其作用机制仍不清楚。通过SuperTopflash荧光素酶报告基因系统,我们确定了longdaysin选择性抑制Wnt/β-catenin信号通路的作用;在Hs578T和MDA-MB-231乳腺癌细胞中,通过蛋白免疫印迹实验,检测了Wnt相关蛋白的表达水平;通过实时荧光定量PCR实验,分析了Wnt靶基因mRNA的表达水平;通过克隆形成实验,研究了longdaysin对乳腺癌细胞克隆形成的影响;通过Transwell实验,验证了longdaysin对乳腺癌细胞迁移及侵袭的作用;通过微球体形成实验,评估了longdaysin对Hs578T细胞中肿瘤干细胞的效用;最后,通过建立MDA-MB-231细胞裸鼠移植瘤模型,鉴定了longdaysin在小鼠体内的抑制乳腺癌的作用。我们的研究表明,longdaysin通过靶向作用CK1δ和CK1?抑制Wnt/β-catenin信号通路。该化合物显著减少细胞内磷酸化LRP6、磷酸化DVL2、活化β-catenin、总β-catenin的蛋白表达水平,导致Wnt靶基因表达的下调。进一步的Transwell实验结果表明,longdaysin通过靶向作用CK1δ和CK1?抑制了Hs578T和MDA-MB-231乳腺癌细胞的克隆形成、迁移以及侵袭。在MDA-MB-231细胞裸鼠移植瘤模型中,longdaysin通过Wnt/β-catenin信号通路抑制了裸鼠肿瘤的生长。总的来说,该研究首次发现longdaysin能够通过阻断Wnt/β-catenin信号通路,发挥其抗乳腺癌作用。鉴于Wnt/β-catenin信号通路在乳腺癌发生发展中的重要作用,longdaysin有潜力成为一种应用于临床治疗乳腺癌的新药物。