弧菌是多存在于海洋、河口环境中和动物体内的常在菌,也是海洋水生动物的常见病原菌,对水产养殖业造成巨大经济损失,严重危害水产养殖业的健康发展,同时该菌也是重要的人畜共患病原菌。随着贝类养殖产业规模化、集约化、密集化及多种养殖模式的出现,弧菌病已成为养殖贝类的常见病害,造成贝类死亡现象日益严重。因此,查明主要经济贝类弧菌病的流行情况,与致病性密切相关的毒力基因分布和弧菌耐药情况,为贝类弧菌病预警机制的建立和防控方法提供理论数据,为贝类弧菌病防控技术的发展提供科学基础。为调查海洋中弧菌的流行情况,本研究2019、2020年从山东省六个沿海地区采集贝类样品,通过选择性培养基等方法分离鉴定弧菌,利用PCR方法鉴定分离菌株的主要毒力基因,利用药物敏感纸片扩散法分析菌株的耐药性,结果如下:1.弧菌是海洋环境中的常见菌之一,在采集的230份样品中,共分离出359株不同类型弧菌,分离出的弧菌包括溶藻弧菌、哈氏弧菌、副溶血弧菌、东方弧菌、需钠弧菌、Vibrio owensii、Vibrio chagasii等。统计结果表明,检出率比较高的是哈氏弧菌、溶藻弧菌和副溶血弧菌,分别为13.9%、25.3%和8.9%。不同贝类中弧菌的检出率也不相同,副溶血弧菌在牡蛎、文蛤中的分离率较高,各分离出15.6%,哈氏弧菌在牡蛎中的分离较高,为18%,溶藻弧菌在文蛤中分离较多,为13.2%。不同地区中弧菌的检出率是不同的,其中哈氏弧菌在滨州的检出率较高,为30%;溶藻弧菌在日照,东营的检出率较高为26.4%,28.6%;副溶血弧菌在日照的检出率较高为25%。2.对分离的359株弧菌进行了头孢噻肟、氨苄西林、阿莫西林、四环素、多西环素、米诺环素、复方新诺明、卡那霉素、克林霉素、丁胺卡那、氟苯尼考、恩诺沙星、大观霉素、多粘菌素B、氨曲南的药敏试验,结果显示分离菌株对头孢噻肟、大观霉素、恩诺沙星、复方新诺明敏感性较高,分别为99.72%、94.71%、91.64%、94.99%。氨苄西林、阿莫西林耐药率较高,分别为59.89%、33.98%。这提示我们在今后弧菌的疫病防控中,可以多使用大观霉素、恩诺沙星、复方新诺明。3.哈维氏弧菌、溶藻弧菌、副溶血弧菌是我国沿海地区食源性疾病暴发中最常见的一种病原菌,近几年随着海鲜类食品在市场的广泛流通,所引发的食物中毒事件也逐渐增多。弧菌中存在很多的毒力基因,主要毒力基因包括toxR、tdh、trh、tlh、FlaA、OmpW、AspA、Fur等。副溶血菌调控基因toxR检出率为43.75%,毒力贡献基因OmpW检出34.38%。哈氏弧菌分毒力基因LuxR检出36%,调控基因toxR检出率为48%。毒力调控基因toxS,tcpA、fur毒力基因是存在于溶藻弧菌中的毒力基因,各检测出51.65%、43.96%、43.96%,而毒力基因zot检测出18.68%。综上所述,通过对2019年和2020年山东省贝类弧菌病的流行病学调查,掌握了贝类弧菌病的流行情况,为弧菌病的防控预警机制的建立提供了基础数据;分离弧菌耐药结果,为贝类弧菌病的防控和药物筛选提供了依据;解析了分离弧菌主要毒力基因的分布规律,为毒力菌株的鉴定及致病性菌株的筛选提供基础,同时为有效地预防弧菌传染病的大面积暴发提供了科学依据。