【摘 要】
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黄霉素是一种绿色的促生长类饲料添加剂,能够有效地增加动物对饲料的吸收利用率,促进动物生长,在动物体内无残留,被广泛应用于养殖业中,其应用前景广阔。本文主要对实验室保
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黄霉素是一种绿色的促生长类饲料添加剂,能够有效地增加动物对饲料的吸收利用率,促进动物生长,在动物体内无残留,被广泛应用于养殖业中,其应用前景广阔。本文主要对实验室保藏的一株黄霉素产生菌进行形态学观察和菌种鉴定,确定本实验所用菌种为斑驳链霉菌。优化杯碟法检测过程中为每50 mL培养基中菌悬液最佳添加量5 mL(菌悬液浓度7.3×108 cfu/L),上层培养基中琼脂最佳含量为2.0%,用杯碟法和HPLC法检测黄霉素的生物效价和含量,构建黄霉素生物效价检测标准曲线。采用单因素法优化黄霉素发酵培养基,探讨不同碳源、氮源、(NH4)2S04、K2HPO4和温度等影响因子对发酵产量的影响,在此基础上进行Plackett-Burman实验和Box-Behnken实验,通过响应面设计优化培养基配方,确定最优培养基配方为:玉米淀粉3.57%,玉米浆0.60%,黄豆饼粉2.86%,酵母粉1.0%,蛋白胨0.3%,(NH4)2SO4 0.13%,K2HPO4 0.03%。优化培养基后发酵液生物效价为6905.36 U/mL,产量提高39.24%。在10 L发酵罐上进行扩大培养,对发酵过程中各项发酵参数的变化进行检测和分析,对发酵过程不进行任何干预状态下,发酵过程与Logistic模型吻合程度较高,可以用Logistic模型分析优化黄霉素发酵工艺,在发酵进行到45 h时进行调控。实验中还探索了其他因素对黄霉素发酵的影响,对发酵过程中的各项参数变化进行实时监控,保持发酵液pH 7.5,逐渐提高转速和通气量至550 rpm和600 L/h,并根据糖度变化流加糊化淀粉,使得糖度不低于5%,发酵产量为5386 U/mL,提高59.30%。
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