小麦抗赤霉菌侵染QTL Qfhi.nau-4B近等基因系的选育及精细定位

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Qfhi.nau-4B是抗赤霉病种质望水白中的一个抗侵染主效QTL。本研究利用分子标记辅助选择技术,以三个感病品种绵阳99-323、PH691和绵阳2000-1为轮回亲本,选育了望水白Qfhi.nau-4B的近等基因系。对近等基因系和轮回亲本的抗病性及一些农艺性状的调查分析表明,Qfhi.nau-4B在不同遗传背景和不同环境中均能稳定表达,近等基因系的抗赤霉菌侵染能力与轮回亲本相比有显著提高;除了株高和穗长以外,近等基因系与轮回亲本相比,农艺性状表型上基本一致。在Qfhi.nau-4B近等基因系与其轮回亲本绵阳99-323杂交的F2群体中以病小穗率为指标评价抗侵入性,抗、感植株分离比符合3:1。这一结果表明Qfhi.nau-4B表现为显性单基因的遗传模式。为此,将该QTL命名为Fhb4。为了精细定位Fhb4,利用530个南大2419-望水白重组自交系构建了 Fhb4区段的遗传图谱,图谱总长22.4cM,包含56个分子标记,其中22个是开发自缺失定位于小麦4BL5-0.86-1.00 bin的EST、以及根据小麦与水稻及短柄草的共线性关系和望水白BAC克隆序列的STS标记。利用望水白Fhb4的边界标记BARC20和WMC349、GWM368和CFD39、HBG226和GWM149分别从南大2419-望水白重组自交系群体、PH691背景的BC4F2:3群体和Fhb4近等基因系-绵阳99-323 F2:3群体中筛选在Fhb4区段发生重组的纯合重组体。在筛选重组体的过程中,利用望水白Fhb5的边界标记对其进行了反向选择。最后在三个群体中分别筛到44个、20个和459个不含有望水白Fhb5、仅在Fhb4区段发生重组的纯合重组体。对这些重组体和实验室前期研究中得到的50个绵阳99-323近等基因系重组体分别进行了 3个、2个、2个和4个环境的抗病鉴定。结果表明这些重组体的抗侵染性表现差异显著,可以明显划分为抗、感两类。结合不同遗传背景重组体的基因型分析和抗病性表现,分别将Fhb4定位于Xmag6888-Xmag7237、Xhbg226-Xgwm149、Xhbg226-Xmag7237区间。根据这三个区间之间的重叠关系,Fhb4应该位于1.06 cM的Xhbg226-Xmag7237区间。根据定位于Fhb4区间的STS标记的序列信息以及位于该区间的BAC克隆序列信息,分析了Fhb4所在区段与水稻以及短柄草间的共线性关系,结果发现标记的顺序在水稻和短柄草基因组中基本一致,但相比之下,在小麦中存在重排和缺失。Fhb4区段在水稻3号染色体和短柄草1号染色体上对应的同源区段的物理距离约为140kb和110kb。
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