【摘 要】
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DNA分析技术已在疾病诊断、法医鉴定、分子生物学研究等诸多领域得到广泛应用,然而常用的DNA片段分析仪器—平板凝胶电泳仪存在样品通量小、自动化程度低、样品消耗量大等不
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DNA分析技术已在疾病诊断、法医鉴定、分子生物学研究等诸多领域得到广泛应用,然而常用的DNA片段分析仪器—平板凝胶电泳仪存在样品通量小、自动化程度低、样品消耗量大等不足之处。本文基于开缝试样管阵列进样技术,建立了一种快速、高效、高通量的自动化DNA分离分析系统。第一章综述了毛细管电泳和微流控芯片毛细管电泳技术研究现状以及在DNA分离分析领域的应用,介绍了芯片毛细管电泳技术中的样品引入方法,毛细管电泳及微流控芯片电泳的检测技术,最后提出本论文的工作目的及设计思想。第二章介绍了本文建立的自动进样微流控毛细管电泳DNA分析系统。以7 cm长的液芯波导毛细管为电泳分离通道;毛细管进样端镀一层金属铂,作为试样电动引入探针,结合开缝试样管阵列装置实现纳升级试样的自动引入、换样过程;利用毛细管的液芯波导现象传导荧光信号,简化了光路结构。采用二极管激光器作为激发光源,SYTOX Orange作为DNA荧光染料,易更替、自涂敷的聚乙烯吡咯烷酮(PVP)作为筛分介质,实现了DNA样品自动进样、分离和检测。用于ΦX174-Hae III digest和DL2000 DNA标准样品分离,检出限达0.4 ng/μL (S/N=3),理论塔板数达到7.3×106/m(603 bp),样品通量33次/h,样品消耗仅0.3 nL。整个系统分析速度快、分离效果好、重现性好、检测灵敏度高、样品消耗量少,是一种易于实现高通量分析的DNA分析检测装置。第三章对本论文建立的自动化、高通量的DNA分析系统进行了总结和展望。
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