射频热凝对胶原酶化学溶解术影响的体外实验研究

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目的:通过检测腰椎间盘髓核组织中羟脯氨酸和糖胺多糖的吸光度值及观察椎间盘髓核组织病理结构变化,探讨射频热凝对胶原酶化学溶解术的影响。方法:本实验纳入24例行腰椎间盘髓核摘除术的患者,自术中获得的髓核组织,称取整块重量为1g标本,随机分为4组(n=6):单纯射频组(I组)、单纯胶原酶组(Ⅱ组)、射频热凝联合胶原酶组(Ⅲ组)、空白对照组(Ⅳ组)。I组采用标准射频(温度90℃,时间120s×2次)后,注入生理盐水0.3ml;Ⅱ组注射胶原酶(50U,0.3ml);Ⅲ组采用射频热凝,待温度下降到40℃以下,再注射胶原酶(射频参数与胶原酶量分别同I组与Ⅱ组);空白对照组(Ⅳ组)注射生理盐水0.3ml。将所有标本置于(内含0.01mol/L CaC12)生理盐水0.5ml无菌试管内,放入37℃恒温箱24小时后,标本经高速离心,通过分光光度计法测量上清液中羟脯氨酸和糖胺多糖的值,并对离心后的沉淀物行组织学病理检查。结果:1)四组中羟脯氨酸吸光度值分别为:0.096±0.021;0.549±0.021;0.314±0.112,0.087±0.040;Ⅱ组、Ⅲ组均高于Ⅰ组、Ⅳ组(P<0.05),Ⅱ组高于Ⅲ组(P<0.05),而Ⅰ组与Ⅳ组差异无统计学意义(P=0.86)。2)四组中蛋白多糖吸光度值分别为:0.012±0.002;0.130±0.051;0.054±0.025;0.006±0.002;Ⅱ组、Ⅲ组均高于Ⅰ组、Ⅳ组(P<0.05);Ⅱ组值高于Ⅲ组(P<0.05),而Ⅰ组与Ⅳ组差异无统计学意义(P=0.74)。3)组织学变化:Ⅰ组可见髓核细胞出现空泡变性,胶原纤维收缩,排列方向无明显改变;Ⅱ组可见髓核中的胶原纤维基本被胶原酶溶解,仅留下纤维网状空泡结构,间质染色浅;Ⅲ组髓核细胞数目减少,变形,细胞间距增大,出现明显空泡变性,胶原纤维排列紊乱;Ⅳ组胶原纤维网疏松,粗细不均,呈波浪状,胶原纤维呈梭形、锥形纤维化,有规律性的网眼结构消失;软骨细胞散在排列于胶原纤维之间,可见多个软骨细胞组成的细胞岛。结论:本实验证实①胶原酶能溶解胶原纤维,降解椎间盘内蛋白多糖。②射频热凝能够使椎间盘髓核变性,胶原纤维收缩。③射频热凝减少胶原酶对椎间盘髓核组织的溶解。
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