脂滴是细胞内储存脂质的细胞器,在多种组织器官中都有分布,脂滴通过其代谢产物影响机体的多种功能。子宫颈作为雌性动物生殖系统中重要的生殖器官,在不同生殖时期有着不同的功能和状态。本课题组已经通过子宫颈的超微结构和油红O染色,发现子宫颈上皮中存在大量脂滴。本研究采用各种方法证明与脂滴代谢相关的蛋白在子宫颈组织中的表达情况,以了解不同生殖时期脂滴的代谢状态,为以后研究子宫颈脂滴在生殖上的作用提供理论基础。为确保小鼠子宫颈取材的准确性,本试验首先通过对空怀小鼠生殖道进行横切和纵切并进行HE染色,以了解子宫体、子宫颈和阴道各自组织学特点。结果显示子宫体上皮为单层柱状上皮,上皮下组织中有腺管。而子宫颈内口上皮与子宫体类似,但上皮下组织中无腺管,子宫颈外口处为复层鳞状上皮,与阴道复层扁平上皮不同,上皮下组织也无腺管。其次,分别取空怀期、妊娠期、和分娩期的成年小鼠子宫颈组织做了电子显微镜观察。结果显示三个时期子宫颈组织都有大量脂滴存在,且集中在上皮细胞中。空怀期子宫颈上皮细胞中的脂滴密度均匀,主要在细胞核下,细胞中自噬体较少。妊娠期和分娩期子宫颈上皮细胞中脂滴密度不均匀,部分脂滴空泡化,细胞中自噬体数量较多。说明妊娠期和分娩期,脂滴发生代谢,细胞中自噬增强。最后,通过免疫组织化学法和免疫印迹法对与脂滴代谢相关的几个重要的蛋白进行定位与定量研究。结果表明与脂滴代谢相关的蛋白在子宫颈组织中表达量各异。与脂滴合成相关的核受体蛋白PPARγ在空怀期表达量比较高,而妊娠期和分娩期表达量比较低;与脂滴分解相关的蛋白HSL和ATGL在妊娠期表达量最高,分娩期其次,表达量最低的是空怀期。cAMPK通过磷酸化HSL促进脂滴代谢,其表达规律和HSL类似;AMPK在能量代谢中发挥重要的作用,但是在宫颈上皮中几乎不表达,而在上皮下结缔组织和肌肉组织中表达量比较高。分娩期表达量最高,其次是妊娠期,空怀期最低;cPLA2是分解细胞内磷脂的酶,妊娠期和分娩期表达明显比空怀期高;通过免疫组织化学法对PGE2进行定位。结果显示,子宫颈上皮中含有大量PGE2;LC3在子宫颈上皮中阳性比较高,通过免疫印迹法显示妊娠期和分娩期LC3表达量均比空怀期高。通过以上结果证明,妊娠期和分娩期子宫颈上皮细胞中脂滴发生明显的分解代谢。其分解产物可能是PGE2的合成原料,妊娠期和分娩期子宫颈上皮细胞中发生明显的自噬,和脂滴代谢有关。