本地早蜜橘炭疽病病原鉴定及防治研究

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本地早蜜橘(Citrus succosa Hort. ex Tanaka)味甜少酸,汁多化渣,是鲜食和加工橘片罐头的地方特色优良品种。然而,本地早柑橘炭疽病常年危害,严重影响了果品的产量和品质。国内外对本地早果实炭疽病的研究鲜有人报道,本研究以本地早柑橘果实为试材,分离获得59株炭疽病菌株,通过形态学和分子技术鉴定病原种类,研究了病菌对甲基硫菌灵的抗性频率,室内测定了6种杀菌剂对病菌的毒力,并进行了田间防治试验,获得如下结果:1、对来自台州不同地区本地早果实炭疽病样品,分离获得59个菌株,根据PDA培养基上的生长菌落特征可以分为2类。A类:菌落白色或灰白色,培养后期可产生朱红色分生孢子团,共36株;B类:菌落初始为白色或灰白色,培养过程中菌落变黑,可产生黑色素,培养后期未观察到朱红色分生孢子团,共23株。取分生孢子团镜检发现,分生孢子椭圆形至短圆筒形,无色,单孢,大小12-18.9gm×3-8.9μm,内常有1-2个油球。选择A、B类菌株,离体测定了对柑橘果实的致病性,结果表明A、B类菌株都可以侵染果实,接种果实发病率为100%。选择两类型的部分菌株,采用胶孢炭疽菌(Colletotriehum gloeosprioides)、尖孢炭疽菌(C. acutatum)的特异性引物Cgl nt/ITS4和Calnt/ITS4,进行PCR扩增,结果表明:以Cglnt/JTS4为引物,可以从两类菌株中扩增出约500bp的条带,而Calnt/ITS4为引物,未扩增出条带。以通用引物ITS4/ITS5,进行PCR扩增后测序,结果用NCBI中的B1ast工具进行比对,发现两类菌株与胶孢炭疽菌(C. gloeosprioides)(JQ580528, AJ301988.1)同源性达99%。综合以上试验结果,将引起本地早果实炭疽病的病原鉴定为胶孢炭疽菌【C.gloeosprioides)2、采用区分剂量法测定59株炭疽病菌对甲基硫菌灵的抗性频率。结果表明椒江区三甲农场分离的14个菌株中12个是抗性菌株,抗性比例为86%,黄岩区的45个菌株的抗性比例达100%。3、采用生长速率法测定了6种杀菌剂对柑橘炭疽病菌室内毒力,结果表明:吡唑醚菌酯、嘧菌酯、咪鲜胺、唑醚·代森联、甲基硫菌灵和丙森锌对炭疽病抑制菌丝生长的EC50值分别为0.81、2.58、0.066、4.97、1555.5、237.98μg/m1。4、采用孢子萌发法测定了4种杀菌剂对柑橘炭疽病菌室内毒力,结果表明:吡唑醚菌酯、嘧菌酯、咪鲜胺和唑醚·代森联对柑橘炭疽病抑制孢子萌发的EC种值分别为0.93、14.34、4.47、5.29μg/ml。5、2011、2012年,应用60%唑醚·代森联WG、25%吡唑醚菌酯EC、70%丙森锌WP、25%嘧菌酯SC和25%咪鲜胺EC进行了田间防治柑橘炭疽病的试验,田间试验结果表明,嘧菌酯、咪鲜胺、丙森锌和唑醚·代森联在试验剂量下对炭疽病的防效在95%以上,各药剂在试验剂量下2012年的防效比2011年稍低,但各药剂的防效趋势和2011年相一致。因此,可以认为嘧菌酯、咪鲜胺、丙森锌和唑醚·代森联是防治柑橘炭疽病的有效药剂。
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