论文部分内容阅读
本研究通过免疫组化方法检测硫化氢的两种关键酶CBS、CSE在人足月轻、重度子痫前期和正常妊娠胎盘组织及脐动静脉血管内皮及平滑肌中的表达情况,并应用血管环等长张力实验测定外源性硫化氢和一氧化氮对人足月轻、重度子痫前期和正常妊娠离体脐动静脉血管平滑肌的调节作用,探讨硫化氢和一氧化氮的可能作用机制,为预防和治疗子痫前期提供理论依据。第一部分CBS、CSE在子痫前期和正常妊娠胎盘血管中的表达及外源性H2S对离体脐动静脉血管平滑肌的舒缩作用研究目的检测CBS、CSE在人足月轻、重度子痫前期和正常妊娠的胎盘及脐动、静脉血管内皮平滑肌中的表达;测定外源性硫化氢对人足月轻、重度子痫前期和正常妊娠离体脐动静脉血管平滑肌舒缩作用。研究方法1、用免疫组织化学技术检测人足月轻、重度子痫前期和正常妊娠的胎盘及脐动、静脉血管内皮及平滑肌中的表达。2、应用血管环等长张力实验测定外源性硫化氢对人足月轻、重度子痫前期和正常妊娠离体脐动、静脉血管平滑肌舒缩作用,方法如下:向挂入血管环的浴槽中加入80mmol/L高钾溶液预收缩,待收缩反应曲线至平台后,累积给予10-160μmo/L硫化氢供体硫氢化钠(NaHS),观察记录硫氢化钠对80mmol/L高钾溶液所致血管环收缩的舒张作用。结果1、免疫组化结果显示,在轻、重度子痫前期和正常妊娠的胎盘合体滋养细胞的胞浆中均见CBS、CSE的阳性表达;在脐动、静脉血管内皮及平滑肌中偶见CBS、CSE的阳性表达。2、1)脐动、静脉在80mmol/L高钾溶液的作用下均发生明显收缩,且脐动脉收缩的幅度大于脐静脉(P<0.01);2)轻、重度子痫前期组血管环对80mmol/L高钾溶液的收缩反应均高于正常组(P<0.01);重度子痫前期组血管环对80mmol/L高钾溶液的收缩反应高于轻度子痫前期组(P<0.05);3)硫氢化钠(NaHS)对轻、重度子痫前期和正常组脐动、静脉血管均有舒张效应,并呈浓度依赖性;硫氢化钠(160μmo/L)对轻、重度子痫前期组血管环的舒张作用均弱于正常组(P<0.01);重度子痫前期组血管环的舒张作用弱于轻度子痫组(P<0.05)。结论1)在人足月轻、重度子痫前期和正常妊娠的胎盘血管中均有CBS.CSE的阳性表达,说明人胎盘血管中可以生成内源性硫化氢,并且可能在妊娠过程中发挥生理作用;2)外源性硫氢化钠对轻、重度子痫前期组和正常妊娠组离体脐动静脉血管均有舒张效应,并且呈浓度依赖性;硫化氢对轻、重度子痫前期组舒张作用低于正常组;重度子痫前期组血管环的舒张作用弱于轻度子痫组,说明硫化氢对于轻、重度子痫前期和正常妊娠血管平滑肌敏感性存在不同,重度子痫前期对硫化氢的敏感性较弱。第二部分外源性NO对子痫前期和正常妊娠离体脐动静脉血管平滑肌的舒缩作用研究目的测定一氧化氮对人足月轻、重度子痫前期和正常妊娠的离体脐动静脉血管平滑肌舒缩作用。研究方法应用血管环等长张力实验测定外源性一氧化氮对人足月轻、重度子痫前期和正常妊娠的离体脐动静脉血管平滑肌舒缩的作用,方法如下:向挂入血管环的浴槽中加入80mmol/L高钾溶液预收缩,待收缩反应曲线至平台后,按浓度递进方式加入一氧化氮(NO)供体硝普钠(SNP)溶液(10-8~10-5mol/L),观察记录其舒张作用。结果1)在10-8~10-5mol/L的浓度范围内,硝普钠对轻、重度子痫前期组和正常组的离体脐动、静脉血管平滑肌均有明显的舒张作用,并且呈剂量依赖性;2)硝普钠对轻、重度子痫前期组舒张作用弱于正常组(P<0.01);重度子痫前期组舒张作用弱于轻度子痫组(P<0.05)。结论1)一氧化氮对人足月轻、重度子痫前期组和正常妊娠组的离体脐动静脉血管平滑肌均有明显的舒张作用,并且呈剂量依赖性;2)一氧化氮对正常组血管平滑肌的舒张作用大于子痫前期组;重度子痫前期组舒张作用弱于轻度子痫组。结果说明一氧化氮对于轻、重度子痫前期和正常妊娠血管平滑肌敏感性存在不同,重度子痫前期对一氧化氮的敏感性较弱;与硫化氢相比,对脐动静脉血管舒张作用特性两者类似。总结1、人足月轻、重度子痫前期组和正常妊娠组的胎盘血管中均发现有硫化氢的两种关键酶CBS、CSE的阳性表达,说明人胎盘血管中可以生成内源性硫化氢,并且可能在妊娠过程中发挥生理作用。2、硫化氢和一氧化氮对轻、重度子痫前期和正常妊娠离体脐动静脉血管平滑肌均有舒张作用,并且呈浓度依赖性。两者对子痫前期组舒张作用低于正常组,重度子痫前期组舒张作用弱于轻度子痫组。结果说明硫化氢和一氧化氮对于轻、重度子痫前期和正常妊娠血管平滑肌敏感性存在不同,重度子痫前期对硫化氢的敏感性较弱。3、硫化氢和一氧化氮相比,对离体脐动静脉血管平滑肌舒张作用特性两者类似。推测硫化氢与一氧化氮可能作为调节人类胎盘血管平滑肌张力的分子开关,为子痫前期的机制研究提供新思路。