漳平市杜鹃花产业调查与VIGS技术体系初步构建

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本研究通过文献检索、实地走访和电话咨询等方式进行漳平市杜鹃花产业现状分析,从中发现杜鹃产业存在的问题,最后提出相应对策,旨在促进漳平市杜鹃花产业健康持续发展。目前漳平市杜鹃花产业存在品种引种为主,缺乏自主培育品种问题,同时杜鹃花多以杂交育种为主,所需时间长,品种更新缓慢,而VIGS技术作为一种简单、快速、高通量的基因功能分析方法,还未应用到杜鹃中,因此本研究开展了杜鹃花VIGS技术的体系构建,进行杜鹃花观赏性相关基因的功能验证,利于漳平市杜鹃花新品种的培育,从而促进杜鹃产业发展。本文的主要研究结果如下:1.对漳平市杜鹃花产业的生产情况、商品情况、发展优势和经营情况进行调查,结果如下:(1)龙岩作为福建省杜鹃花产业的主产区,2015年种植面积达400 hm2,占福建省87%;(2)漳平市杜鹃花产业规模虽然有所缩小,甚至在2013年出现产值下滑18%的情况,但是近两年漳平市专业化生产水平逐步成熟、生产技术不断提高,经济效益不断提高,产值呈现上升趋势(3)搜集到的漳平市杜鹃花产业中约100个杜鹃花品种,从中发现的杜鹃商品花色主要为红色和紫色,花形特征为大花和重瓣;盆花和苗木为主要的商品类型,盆景杜鹃是新兴的商品类型(4)漳平市杜鹃花产业由于土地与租金问题,主要以个体农户为经营模式;销售模式大部分为传统的批发,开店,进驻商场的方式,互联销售模式逐渐兴起。2.漳平市杜鹃花产业发展中存在的问题有:(1)商品化品种依赖引种,缺乏自主知识产权品种;(2)产品类型和产品应用创新能力不足;(3)产业运营有待完善,花企缺乏综合竞争力。3.漳平市杜鹃花产业发展的优势条包括:适宜的气候环境和独特的区位交通优势,悠久的杜鹃花栽培历史,政府部门和相关政策的支持,丰富的种质资源,充沛的劳动力,以及良好的花卉市场发展潜力。4.通过对漳平市杜鹃花产业存在的问题和其优势条件的分析,提出了一系列有助于漳平市杜鹃花产业发展的对策:(1)重视新品种研发,提升品种创新能力;(2)丰富产品类型,拓宽产品应用;(3)加强产学研合作,提升花企综合竞争力;(4)提升产业现代化水平,优化产业运营。5.基于烟草脆裂病毒载体,进行杜鹃VIGS病毒载体的构建。成功克隆了杜鹃392 bp的PDS基因片段、472bp的CHS基因片段、400bp的DFR基因片段、372bp的RDR2A基因片段和350bp的MADS基因片段。同时构建了杜鹃VIGS病毒载体包括,VIGS-PDS 载体、VIGS-CHS 载体、VIGS-DFR 载体、VIGS-MADS载体、VIGS-RDR2A载体。6.杜鹃VIGS技术体系的建立与优化。以杜鹃嫩叶和成熟叶为实验材料,设置不同处理的侵染液浓度OD600值分别为1.0、1.5和2.0,采用注射法将含有VIGS-PDS载体的农杆菌瞬时转化杜鹃植株。通过对侵染后叶片的表型观察和统计,发现杜鹃嫩叶和成熟叶均出现PDS基因表达受抑制的表型。初步表明采用pTRV病毒载体可以用于杜鹃植株的基因沉默。并且在综合分析了不同侵染液浓度(OD600值)对杜鹃叶片PDS基因沉默的效果,以及对叶片生长发育的影响,确定了较适宜的侵染液OD600值为1.0。7.杜鹃花器官VIGS技术的构建与优化。设置OD600值为1.0和2.0两种侵染液浓度,采用注射法和涂抹法处理杜鹃的花苞和半开放的花苞的基部,以及开放花的花瓣。对侵染后的花器官进行表型观察和统计,发现开放花均未出现预期的CHS基因、DFR基因、MADS基因和RDR2基因表达受抑制的表型。但通过比较分析各组实验处理结果,本文对杜鹃花器官VIGS体系的构建提出了一些值得参考的建议。
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