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目的：检测microRNA-429(miR-429)在结直肠癌组织中的表达,评估其表达与结直肠癌患者临床病理参数及预后的关系,并初步探讨其在结直肠癌细胞凋亡中的作用机制。方法：1.应用实时荧光定量PCR (qRT-PCR)方法检测miR-429在107例结直肠癌患者肿瘤组织及癌旁正常组织中的表达水平,分析其表达与结直肠癌患者临床病理参数及预后的关系。2.应用脂质体(Lipofectamine)2000瞬时转染的方法,将化学合成的miR-429mimics或：niR-negative control mimics转染到结肠癌细胞系HT-29中。然后采用qRT-PCR检测转染前后miR-429的表达,确定转染效率；采用流式细胞术检测转染前后细胞凋亡的变化；采用caspase-3活性测定试剂盒检测转染前后caspase-3活性的改变,并利用Western blot检测活化caspase-3蛋白的表达水平。3.应用生物信息学分析软件TargetScan和miRanda预测miR-429的可能靶基因为SOX2；利用荧光素酶报告基因实验,将含有SOX2基因3’端非编码区序列(WT-SOX23’-UTR)或突变序列(MUT-SOX23’-UTR)的荧光素酶报告载体与miR-429mimics或miR-negative control mimics共转染到HT-29细胞系中,检测荧光素酶的活性,验证预测结果。瞬时转染miR-429mimics或rniR-negative control mimics,采用qRT-PCR及Western blot方法检测潜在靶基因SOX2mRNA及蛋白水平的表达改变。采用qRT-PCR方法检测SOX2在107例结直肠癌患者肿瘤组织中的表达水平,分析miR-429与SOX2表达的相关性。4.应用瞬时转染的方法将miR-429mimics或miR-negative control mimics与PCMV-HA-SOX2质粒共转染到HT-29细胞系中。然后采用流式细胞术检测转染前后细胞凋亡的变化；采用caspase-3活性测定试剂盒检测转染前后caspase-3活性的改变,并利用Western blot检测活化caspase-3蛋白的表达水平。探讨miR-429影响结直肠癌细胞凋亡的可能作用机制。结果：1qRT-PCR结果显示,与癌旁正常组织比较,miR-429在结直肠癌组织中的表达明显上调,二者相比较有显著的统计学差异(P<0.0001),其中,69%(73/107)的患者miR-429表达上调水平大于2倍。2.MiR-429表达与结直肠癌患者肿瘤大小及淋巴结转移显著相关(P<0.05),而与年龄、性别、肿瘤位置、细胞分化程度、浸润深度及临床分期无显著相关性(P>0.05)。MiR-429高表达患者5年总体生存率显著低于miR-429低表达患者(P=0.002)。Cox回归多因素分析结果显示miR-429高表达是影响结直肠癌患者预后的独立因素(RR：2.165,95%CI：1.015-4.618,P=0.046)。3.将miR-429mimics或miR-negative control mimics转染HT-29细胞,与转染miR-negative control mimics组相比,niR-429mimics转染组miR-429表达水平显著升高(P<0.0001)；细胞凋亡率显著下降(P<0.01)；caspase-3活性显著减弱(P<0.01),同时活化caspase-3蛋白的表达水平也明显降低。4.生物信息学分析软件TargetScan和miRanda预测结果显示SOX2的3’-UTR区含有可与miR-429互补结合的序列。荧光素酶报告基因实验显示,与对照组相比,共转染miR-429mimics与含WT-SOX23’-UTR的荧光素酶报告载体时,细胞的荧光素酶活性明显下降(P<0.05),表明miR-429能够与SOX2的3’-UTR区直接结合。在转染miR-429mimics的结直肠癌细胞中,SOX2mRNA及蛋白表达水平均显著下降。分析qRT-PCR检测结果发现SOX2和miR-429在结直肠癌组织中的表达呈显著负相关(r=-0.292,P=0.002)。5.与对照组相比,共转染miR-429mimics与PCMV-HA-SOX2质粒组的结直肠癌细胞凋亡率、caspase-3活性及活化caspase-3的蛋白表达水平均部分恢复(P<0.05)。转染PCMV-HA-SOX2质粒组细胞凋亡率、caspase-3活性及活化caspase-3蛋白的表达水平均明显增加(P<0.05)。结论：1.MiR-429在结直肠癌组织中表达显著高于癌旁正常组织,与肿瘤大小及淋巴结转移显著相关,并且是影响患者预后的独立因素,提示其可能在结直肠癌的发生发展中发挥重要作用,并可作为预后标志物,具有潜在的临床应用价值。2.MiR-429可能通过直接下调SOX2表达,进一步抑制caspase依赖的凋亡途径,从而参与结直肠癌发生发展,为阐明miR-429在结直肠癌发生发展中的具体作用机制提供了新的线索,并为结直肠癌的治疗提供了新的思路。