新生儿缺氧缺血性脑病（HIE）是由于围产期各种缺氧缺血（HI）因素引起的神经系统损伤性疾病。死亡率高，往往有智力低下、脑瘫、癫痫等后遗症，是引起儿童神经系统伤残的常见原因之一，已成为国内外围产医学界研究的热点。HIE发病机制极其复杂，有关脑损伤的机理尚不完全清楚。 对HIE发病机制的研究多集中在神经元方面，随着对胶质细胞研究的不断深入，人们发现胶质细胞在脑HI后异常活跃，出现复杂的分子水平变化，对神经元的损伤具有双向作用。胶质细胞在不同的发育阶段可塑性及对微环境的反应不同，新生儿/鼠脑胶质细胞比成年人/鼠脑有更强的可塑性，但对HI有更大的易感性。以往对胶质细胞在HIBD中的作用的研究多集中于成年鼠，且多限于对星形胶质细胞，对小胶质细胞及少突胶质细胞的研究则较少。关于新生鼠或新生儿HIBD后三种胶质细胞变化的全面研究尚未见报道。故对新生鼠或新生儿HIBD后整个胶质网络中不同细胞的复杂变化及其与神经元的相互关系的研究，将为下一步在更深层次上探讨胶质细胞在新生儿HIE的发病机制中的作用，以及由此在治疗方面开辟新的途径而奠定基础。 本研究分三部分，第一部分研究新生儿HIE神经细胞凋亡、胶质细胞改变，以及神经病理与临床的联系；第二部分通过动物实验观察新生大鼠HIBD胶质细胞的变化及其与神经元凋亡的关系。第三部分观察妥泰对新生HIBD大鼠的脑保护作用。 对25例新生儿HIE脑病理标本除进行组织病理研究外，并尝试通过免疫组化及原位末端TUNEL法观察HI条件下神经细胞凋亡及胶质细胞的变化，以期对新生儿HIE的发生、病程、围产儿的成熟度与神经病理进行综合<WP=113>分析，有利于对新生儿HIE的发病机制进行深入研究，以便指导临床。但通过HIE病理标本进行观察研究也存在一定的局限性，如死亡患儿均为重度，难以准确比较不同程度HIE患儿胶质细胞的变化规律；由于本病均于生后短期内死亡，无法观察胶质细胞在HIBD后不同时间点的动态变化，尤其是新生儿后期的变化；另外，临床因素复杂难以控制，无法在短期内总结出更深层次的规律，为此，本文拟通过动物实验来弥补这一不足。 由于胎儿宫内窘迫与出生窒息是导致新生儿HIE的最主要因素，故本研究通过结扎足月孕鼠双侧子宫动脉的方法复制围生期HIBD动物模型。应用免疫组化方法标记胶质细胞（GFAP标记星形胶质细胞，MBP标记少突胶质细胞，IsolectinB4凝集素标记活化的小胶质细胞），原位末端TUNEL法标记凋亡细胞，首次全面系统地观察围产期不同程度（轻度为结扎孕鼠双侧子宫动脉15min、重度为结扎孕鼠双侧子宫动脉25min）HIBD大鼠不同时间点（生后0.5h、3h、6h、24h、3d、7d、14d、21d、28d）三种胶质细胞的变化规律及与神经细胞凋亡的关系。 妥泰是一种结构独特的高效广谱新型抗癫痫药物，新近国外学者已观察到其具有潜在的神经保护作用，但其对HIBD后三种胶质细胞的变化及神经细胞凋亡的作用尚未见报道，故本研究应用结扎足月孕鼠双侧子宫动脉25min的重度HIBD动物模型，采用灌胃给药的方法，观察妥泰不同给药组（1次给药、5次给药）对重度HIBD大鼠的脑组织含水量、胶质细胞的变化、神经细胞凋亡、运动功能的发育的影响，并通过Morris水迷宫实验观察学习记忆能力。 研究结果显示： 1、死亡的新生儿HIE中92%为各种原因所造成的胎儿宫内窘迫及出生窒息。足月儿多发，均在6d内死亡，而2~3d为死亡的高峰时期。 2、25例新生儿HIE脑标本均存在不同程度的脑水肿、颅内出血及神经细胞坏变。新生儿脑水肿、颅内出血的临床症状不典型，不易被发现，而延误治疗。故在临床治疗中应重视脑水肿、颅内出血的高发性，注意更有针对性的治疗与预防。 3、同一病例不同部位水肿程度不同，急性缺氧病例延髓水肿重，越是<WP=114>靠近神经核的部位水肿越重；慢性缺氧大脑水肿较重，延髓改变相对较轻。 4、神经细胞病变包括肿胀、脱失、海绵状变性及层状坏死，足月儿大脑灰质锥体细胞、小脑蒲肯野细胞更易受损，早产儿小脑颗粒层细胞更易受损；慢性缺氧时大脑神经细胞病变的程度重，急性缺氧延髓改变重，混合性缺氧大脑灰质及延髓改变均较重；存活时间越长者小脑蒲肯野细胞病变的程度相对越轻。 5、25例新生儿HIE脑病理标本均可见星形胶质细胞增生，同一标本不同部位星形胶质细胞形态及增生程度不同，不同标本同一部位形态及增生程度亦不同，小脑增生程度表现为生后24h内死亡者增生程度重，生存时间越长，增生程度反而较轻；慢性缺氧大脑星形胶质细胞增生程度重，急性缺氧延髓增生程度重，混合性缺氧大脑及延髓增生程度均较重。 6、25例新生儿HIE均存在不同程度的神经细胞凋亡，存活时间3h的标本亦存在凋亡细胞，不同标本凋亡细胞数目不同，同一标本不同部位凋亡细胞数目亦不同。大脑以存活24h~6d神经细胞凋亡程度重，小脑以存活3d之内神经细胞凋亡程度重，延髓以存活24h~3d神经细胞凋亡程度最重。 7、正常剖腹产新生鼠生后6h开始轻度表达星形胶质细胞，生后14d 开始表达MBP阳性少突胶质细胞，随出生时间延长表达逐渐增强，小胶质细胞活化不明显。 8、HIBD?