运用PCR-RFLP标记检测南瓜疫病菌

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利用1对特异引物对南瓜疫病菌(Phytophthora capsici)及疫霉属(Phytophthora)部分真菌和常见土传真菌12个种的14个菌株的18s rDNA(即Small Subunit Ribosomal DNA)进行扩增,然后利用4种限制性内切酶(EcoRⅠ HaeⅢ HhaⅠ HinfⅠ)酶切PCR扩增产物,分析各菌株间的DNA限制性片段多态性。并运用该PCR-RFLP检测程序对染病南瓜植株进行检测,其结果如下: 1.运用供试引物在所有供试疫霉属菌株上均可扩增到一条长为1770bp的特异DNA 片段。 2.经限制性内切酶酶切和聚类分析,表明采自不同寄主上和同一寄主不同地点的3 个P.capsici在遗传上是一致的。 3.在南瓜植株发病茎病健交界处,发病叶病健交界处,发病果病健交界处,发病叶 片的未显症部位和接种P.capsici 12小时的茎上扩增到了约为1770bp的特异 DNA片段。 4.经限制性酶切分析,该特异DNA片段具有与P.capsici标准菌株完全相同的酶切 图谱,达到了检测目的。本研究结果对南瓜疫病的早期诊断和病害的预测预报有 一定的应用价值
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