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胆汁酸是胆汁的主要成分,以往认为其生理作用主要是促进脂肪及脂溶性物质的消化吸收。新的研究表明,胆汁酸是体内重要的内源性信号分子,具有调节葡萄糖和脂质代谢、机体能量平衡以及免疫应答等广泛的生物学作用。鹅脱氧胆酸(Chenodeoxycholic Acid,CDCA)是肝脏合成的初级胆汁酸之一,在动物采食后从胆囊分泌至肠道中发挥作用。以往对CDCA调节脂质代谢的研究相对较为深入,但对CDCA影响肠道健康的研究较少。为了研究CDCA是否能够影响动物的肠道黏膜屏障功能,本研究开展了以下试验:。试验一在高脂日粮诱导小鼠肠道粘膜屏障损伤的基础上,通过日粮添加CDCA,观察其是否对肠道黏膜屏障损伤具有保护作用。选用4周龄的C57/BL雄性小鼠36只,随机分为对照组、高脂组、高脂+CDCA组。对照组饲喂能量含量为10%的日粮,高脂组饲喂能量含量为60%的日粮,高脂+CDCA组在饲喂高脂日粮的基础上,在日粮中添加了0.5%的CDCA。饲喂4周后采集小鼠的血清和回肠样品,检测小鼠回肠杯状细胞数量及紧密连接蛋白表达水平以及血清中内毒素(Lipopolysaccharides,LPS)含量,发现高脂日粮可导致杯状细胞数目减少、紧密连接蛋白表达减少,而在高脂日粮的基础上添加CDCA则可以显著逆转以上效应。鉴于在高脂日粮诱导的小鼠肠道屏障损伤模型中发现血清LPS升高。为此,试验二通过饮水添加LPS,观察其对小鼠肠道屏障损伤的影响;同时通过日粮添加CDCA,观察肠道黏膜屏障功能的变化。选用4周龄的C57/BL雄性小鼠48只,随机分为对照组、LPS组、CDCA组和LPS+CDCA组,其中LPS组在饮水中添加80mg/L LPS,CDCA组在日粮中添加0.5%的CDCA,LPS组在饮水添加LPS的基础上在日粮中添加CDCA。结果表明:LPS组小鼠血清中FITC-Dxtran含量升高,且小鼠肠道中紧密连接蛋白表达减少,相关信号通路肌球蛋白轻链激酶(myosin light chain kinase,MLCK)表达显著提高,而在日粮中添加CDCA可显著缓解以上效应。为了在细胞和分子水平进一步揭示CDCA对肠道屏障损伤产生保护作用的机制,试验选用猪小肠上皮细胞(Intestinal porcine epithelial cells,IPEC-J2),采用浓度为50μL的CDCA以及1 ng/ml的LPS处理,观察其跨上皮电阻(Trans-epithelium electrical resistant,TEER)以及紧密连接蛋白表达的变化。结果表明:LPS显著导致细胞TEER数值升高,且降低细胞紧密连接蛋白及肌球蛋白轻链激酶的表达,CDCA则显著逆转该效应。进一步在CDCA和LPS处理细胞的同时,干扰FXR或TGR5,结果表明:干扰FXR后,CDCA逆转LPS造成IPEC-J2细胞屏障功能的表型消失,但干扰TGR5则没有类似的效应。通过激活炎症通路蛋白p65的表达,同样阻断了CDCA对肠道屏障损伤功能的缓解作用。以上结果表明:CDCA通过激活FXR,降低炎症信号分子p65的蛋白质表达,减少MLCK的表达,从而缓解肠道黏膜屏障功能的损伤。本研究结果丰富了对胆汁酸调控肠道粘膜屏障功能的认识。