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本研究利用烟草品种抗南方根结线虫(Meloidogyne incognita)与感染PVY-MSNR产生枯斑是同一基因所致,且PVY-MSNR复制酶(PVY-NIB)是烟草叶片接种PVY-MSNR病毒后在抗南方根结线虫品种上产生枯斑的诱导因子。本试验通过人工合成PVY-MSNR株系复制酶基因,构建PVX病毒瞬时表达载体,建立新的烟草抗根结线虫病品种基因鉴定技术体系;通过与国外PVY-MSNR病毒直接接种鉴定,传统抗病性鉴定对比,验证该鉴定体系的准确性。主要研究结果如下:1人工合成PVY-MSNR株系复制酶基因,构建PVX病毒瞬时表达系统,通过农杆菌GV3101介导浸润烟草叶片,在抗南方根结线虫品种上发生过敏性坏死反应,在感南方根结线虫品种上未出现症状,建立新的烟草抗根结线虫病基因(RK)鉴定技术体系,筛选出筛选出含有抗根结线虫病基因(RK)的种质材料19份,并根据枯斑面积占叶片总面积的比例筛选出6个抗病(南方根结线虫)品种,13个中抗品种,以及6个感病品种。2通过基因鉴定技术与国外PVY-MSNR病毒直接接种鉴定比较,基因鉴定结果表明:在抗南方根结线虫品种(K326)上出现枯斑反应,而在感抗南方根结线虫品种(NC2326)上未出现症状,与国外鉴定国外PVY-MSNR病毒直接接种鉴定结果一致。3通过基因鉴定技术与传统抗病性鉴定技术比较,基因鉴定结果表明:T.I706,NC95,G-28,K326,Coker176,Coker86,Mc nair373,Speight G-15,Speight G-33,Speight G-52,中烟14,NC55,NC71,NC89等14个品种,对于南方根结线虫存在抗性,与常规抗病性鉴定结果一致。4通过基因鉴定技术与室内盆栽接种鉴定比较,基因鉴定结果表明:T.I706,YZ90,NC95,G-28,Y8190,K326,Coker176,Coker86,H423,Mc nair373,Speight G-15,Speight G-33,Speight G-52,中烟14,Virginia Gold,NC55,NC71,NC89,云烟87等19个品种对于南方根结线虫表现抗病,以及贵烟11号,中烟90,红大,长脖黄,KY14,NC2326表现感病,与室内盆栽鉴定结果一致。5本研究测定了南方根结线虫侵染前后不同抗性烟草品种防御酶活性,结果表明:在接种之前,抗感烟草品种接种前POD、SOD、CAT活性差异不明显,接种南方根结线虫后,对于SOD活性抗感品种均先迅速下降后急剧上升,但抗病品种比感病品种下降更快,酶活性降到最低,且在接种后7d-28d上升过程中抗病品种SOD活性比感病品种上升更快,达到最高;POD活性抗感品种在接种后先上升后下降,抗病品种NC95的POD活性在各个时期均高于感病品种红大,且抗感品种POD活性均高于未接种处理;南方根结线虫侵染烟草后根部CAT活性变化较大,抗感品种过氧化氢酶活性均逐渐增加,感病品种红大在接种后21天达到最大值,抗病品种NC95在接种28后酶活性达到最大值。抗感品种接种线虫前后POD、SOD、CAT变化说明抗病品种幼苗对南方根结线虫侵染更为敏感。