CircN4BP2L2对卵巢癌细胞生物学行为的影响及卵巢癌差异磷酸化蛋白组学研究

来源 :中国医学科学院北京协和医学院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zhrmghgws001
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第一部分:CircN4BP2L2对卵巢癌细胞生物学行为的影响
  背景与目的:
  卵巢癌是最致命的妇科恶性肿瘤,约占所有女性癌症死亡的5%。上皮性卵巢癌是其最常见的亚型,约占所有卵巢癌病例的90%。由于早期诊断率低,治疗方法有限,且容易复发转移,卵巢癌5年生存率仅为30%。探究卵巢癌发病机制,挖掘潜在的有价值的诊疗靶点,对于提高患者5年生存率具有重要意义。
  越来越多的研究表明,环状RNA在癌症生物学中发挥重要作用,是潜在的生物标志物和治疗靶点。然而,circRNAs在卵巢癌中的表达及功能在很大程度上仍不清楚。
  在本课题组之前的研究中,通过circRNAs测序技术,我们发现在上皮性卵巢癌组织标本中circN4BP2L2表达显著下调,且其低表达与肿瘤FIGO高分期和淋巴结转移密切相关。然而,circN4BP2L2在卵巢癌中的具体作用机制尚不清楚。本研究探究了circN4BP2L2对人卵巢癌SKOV3细胞生物学行为的影响,为circN4BP2L2在卵巢癌发生、发展中的具体机制提供可靠的实验及理论依据。
  研究方法:
  体外合成circN4BP2L2-siRNA并瞬时转染SKOV3细胞,采用qRT-PCR技术检测circN4BP2L2基因沉默效果。通过CCK-8法和平板克隆形成实验检测细胞增殖能力;通过划痕实验和Transwell检测细胞迁移能力;通过Transwell检测细胞侵袭能力。
  研究结果:
  1、CircN4BP2L2-siRNA转染SKOV3细胞后,circN4BP2L2的表达量较对照组显著下降(P<0.05)。
  2、Si-RNA组细胞迁移和侵袭能力较对照组显著增强强(P<0.01)。
  研究结论:
  1、RNA干扰技术可以显著抑制circN4BP2L2在卵巢癌细胞中的表达。
  2、CircN4BP2L2可能通过抑制卵巢癌细胞的迁移和侵袭,起到抑制卵巢癌的发生、发展的重要作用。
  第二部分:卵巢癌差异磷酸化蛋白组学研究
  背景与目的:
  卵巢癌是全球死亡率最高的十大癌症之一。由于缺乏有效的筛查手段,绝大多数患者诊断时已是晚期,极易出现肿瘤复发和化疗耐药,对女性健康和生命安全构成严重威胁。目前主要治疗方法仍然是肿瘤细胞减灭术和以铂类为基础的化疗相结合的综合治疗。了解其发病机制,发现新的诊疗靶点,对于改善卵巢癌患者预后至关重要。
  近年来,蛋白质组学和磷酸化蛋白质组学技术已成为肿瘤研究中发现潜在肿瘤标志物和治疗靶点的重要工具。本研究采用定量磷酸化蛋白组学技术,全面解读卵巢癌组织磷酸化蛋白组学分子特征,探索卵巢癌相关的差异磷酸化蛋白及异常调控途径,目的是发现有价值的诊疗靶点。
  研究方法:
  利用定量磷酸化蛋白组学技术对5例人卵巢癌组织和5例人正常卵巢组织进行质谱分析,获得卵巢癌相关差异磷酸化蛋白。
  研究结果:
  共鉴定出722个差异磷酸化位点,定位于534个磷酸化蛋白(包括65个转录因子和29种激酶)。果糖和甘露糖代谢途径及与此相关的4种糖酵解酶(PFKFB2、PFKL、ALDOA和TPI1)在卵巢癌中发生显著改变。MAPK信号通路、ErbB信号通路和GnRH信号通路也是参与卵巢癌的关键过程。
  研究结论:
  本研究初步探究了卵巢癌相关的差异磷酸化蛋白及代谢和信号通路,为发现有价值的卵巢癌生物标志物和治疗靶点提供了新的思路,也扩展了我们对其病理生理机制的认识。
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